[發明專利]小蒼蘭花葉病毒RT?LAMP檢測引物及其檢測方法在審
| 申請號： | 201710167613.8 | 申請日： | 2017-03-21 |
| 公開（公告）號： | CN106947831A | 公開（公告）日： | 2017-07-14 |
| 發明（設計）人： | 樊榮輝;黃敏玲;鐘淮欽;葉秀仙;羅遠華 | 申請（專利權）人： | 福建省農業科學院作物研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/94 |
| 代理公司： | 福州市鼓樓區京華專利事務所(普通合伙)35212 | 代理人： | 宋連梅 |
| 地址： | 350000 *** | 國省代碼： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 小蒼蘭 花葉 病毒 rt lamp 檢測 引物 及其 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種小蒼蘭花葉病毒RT-LAMP檢測引物，其特征在于：包括以下兩引物對：
外引物F3：5'-GACGAGGTGCGATACCAAGC-3'，
外引物B3：5'-CCTTCAATTTTGCCAACCTTGG-3'；
內引物FIP：5'-CACTCCTTGCTTTTCGCCTTCGCGAATTCAGCAACTTGACGCTGGGGCT-3'；
內引物BIP：5'-GAGCGCGAAATTGCAAAGAATAGCGGAATTCTTGCTCGTGAACCCACATCCAC-3'。
2.一種小蒼蘭花葉病毒RT-LAMP檢測方法，其特征在于：利用權利要求1所述的引物對小蒼蘭花葉病毒進行RT-LAMP擴增檢測，其中反應體系和反應程序具體如下：
反應體系：2.5μL 10×Bst buffer、4μL MgSO4(25mmol/L)、4μL甜菜堿(5mmol/L)、4μL dNTPs(2.5mmol/L)、1μL Bst聚合酶(8U/μL)、2μL的引物FIP(20μmol/L)、2μL的引物BIP(20μmol/L)、0.5μL的引物F3(10μmol/L)、0.5μL的引物B3(10μmol/L)、2μL ddH2O、2.5μL cDNA，反應體系的總體積為50μL；
反應程序為：65℃60min，80℃5min。
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