[發明專利]一種ASE‐HPLC法測定半枝蓮中野黃芩苷含量的方法

在審

• 申請號: 201710165725.X
• 申請日: 2017-03-20
• 公開（公告）號: CN106918662A
• 公開（公告）日: 2017-07-04
• 發明（設計）人: 孫良廣;王麗麗;陳學松
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區梧州食品藥品檢驗所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 廣州市越秀區海心聯合專利代理事務所(普通合伙)44295
• 代理人: 黃為,蔡國

技術領域

本發明屬于化學檢測領域，尤其是一種ASE‐HPLC法測定半枝蓮中野黃芩苷含量的方法。

背景技術

半枝蓮為唇形科植物半枝蓮Scutellaria barbata D.Don的干燥全草，味辛、苦，寒。歸肺、肝、腎經。清熱解毒，化瘀利尿。可用于疔瘡腫毒，咽喉腫痛，跌撲傷痛，水腫、黃疸，蛇蟲咬傷。臨床多用于治療肝癌、胃癌、肺癌等疾病，其主要有效成分是黃酮類化合物。野黃芩苷是半枝蓮中一種含量較高的活性物質，《中國藥典》(2015年版一部)以野黃芩苷含量作為其質量評價的重要指標，具有降低腦血管阻力，改善腦血循環、增加腦血流量及抗血小板凝集的作用，現代藥理研究表明野黃芩苷對腫瘤細胞、肝癌細胞增殖及侵襲能力有明顯的抑制作用。目前，半枝蓮中野黃芩苷的提取方法有醇提回流法、超臨界萃取法、索氏提取法、超聲提取、大孔樹脂純化法等，測定方法有紫外分光光度法、高效液相色譜法、毛細管電泳法、但上述方法前處理提取時間長、測定步驟繁瑣。與傳統方法相比，ASE突出的優點是縮短提取時間，減少溶劑消耗，提高萃取效率。

本發明采用ASE-HPLC法測定半枝蓮中野黃芩苷的含量，操作簡便、快速、結果準確。

發明內容

針對上述不足，本發明旨在提供一種更簡便、快捷控制半枝蓮藥材及其配方顆粒的質量的方法，該方法采用ASE‐HPLC法測定半枝蓮中野黃芩苷的含量。

為了解決上述技術問題，本發明提供的技術方案是這樣的：一種ASE‐HPLC法測定半枝蓮中野黃芩苷含量的方法，依次包括下述步驟：

步驟1：采用ASE萃取粉碎后的半枝蓮樣品，其中ASE萃取方法包括先用石油醚萃取，然后再用甲醇萃取，收集甲醇萃取液；

步驟2：采用HPLC法測定甲醇萃取液中也黃芩苷的含量。

進一步的，所述的步驟1包括下述子步驟：

步驟S1：將半枝蓮樣品粉碎，過三號篩，取過篩后的粉末1g；

步驟S2：與1g的硅藻土混合，裝于放有纖維濾膜的10mlASE萃取池中，加硅藻土至與池口平行，用石油醚萃取；

步驟S3：將石油醚萃取液舍棄，加入甲醇溶液對藥渣進行二次萃取；

步驟S4：收集萃取液，并加甲醇溶液定容至100ml，過濾，得甲醇萃取液。

進一步的，步驟S2所述的萃取，參數如下：萃取溫度為80℃；萃取時間為5min；萃取次數為1次；沖洗體積為100％；吹掃時間為120s。

進一步的，步驟S3所述的萃取，參數如下：萃取溫度為120℃；萃取時間為8min；萃取次數為3次；沖洗體積為60％；吹掃時間為60s。

進一步的，步驟2所述的HPLC法的檢測參數為：色譜柱為Thermo Syncronis C18；流動相為甲醇-醋酸-水；流速為0.3mL/min；檢測波長為335nm；柱溫為40℃；進樣量為5μl。

進一步的，所述的色譜柱的規格為3mm×100mm，3μm。

進一步的，所述的流動相甲醇‐醋酸‐水的體積比為30:66:4。

本發明與傳統方法相比，具有下述優勢：

本發明與中國藥典2015年版一部半枝蓮藥材項下的樣品前處理程序比較，藥典方法較繁瑣、費時，僅樣品提取就需要6‐7小時，花費石油醚與甲醇225ml；而本發明藥材提取花費13分鐘，石油醚與甲醇110ml。

本發明可準確、簡便、快捷地對半枝蓮中野黃芩苷進行含量測定。

附圖說明

圖1為提取溫度的試驗結果圖；

圖2為提取時間的試驗結果圖；

圖3為循環次數的試驗結果圖；

圖4為野黃芩苷線性圖。

具體實施方法

下面結合具體實施方式，對本發明的權利要求做進一步的詳細說明，但不構成對本發明的任何限制，任何在本發明權利要求保護范圍內所做的有限次的修改，仍在本發明的權利要求保護范圍之內。

實施例1

1儀器與試藥

ASE350型快速溶劑萃取儀(美國DIONEX公司)；U3000高效液相色譜儀(美國Thermo Fisher公司)，配紫外檢測器，四元梯度泵，自動進樣器；XA205DU型十萬分之一電子天平(瑞士Mettler-Toledo公司)；ELGA PURELAB ClassicUVF凈化系統。

野黃芩苷(批號：110824-201207，來源：中國食品藥品檢定研究院)；

甲醇為色譜純；

石油醚(60～90℃)；

冰醋酸為分析純；