[發明專利]瓜蔞皮多糖GLP-5-1、其制備方法及用途

有效

• 申請號: 201710160909.7
• 申請日: 2017-03-17
• 公開（公告）號: CN108623699B
• 公開（公告）日: 2021-10-08
• 發明（設計）人: 王輝俊;葉冠;吳若銘;柯櫻
• 申請（專利權）人: 上海醫藥集團股份有限公司
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61K31/715;A61P9/12;A61P9/10;A61P9/00
• 代理公司: 北京金信知識產權代理有限公司 11225
• 代理人: 劉鋒;鄭丹

本發明公開了一種瓜蔞皮多糖GLP?5?1，其單糖組成包括阿拉伯糖、巖藻糖、葡萄糖和半乳糖組成，四種單糖的摩爾比為：(4.5～6.5):(4～6):(6～8):(8～12)。本發明還公開了其制備方法及用途，所述瓜蔞皮多糖GLP?5?1具有腎素抑制作用，可以用于制備腎素抑制劑。

技術領域

本發明涉及中草藥多糖的提?。痪唧w涉及一種瓜蔞皮多糖、其制備方法及用途。

背景技術

瓜蔞皮(Trichosanthispericarpium)為葫蘆科栝樓屬植物栝樓(TrichosantheskirilowiiMaxim.)或雙邊栝樓(TrichosanthesrosthoriniiHarms)的干燥成熟果皮。瓜蔞皮注射液為上藥集團旗下子公司上海第一生化藥業有限公司獨家產品，是以瓜蔞皮為原料，經水提醇沉，再經過離子交換樹脂洗脫而制成的滅菌水溶液，臨床上用于冠心病，穩定型心絞痛的治療，具有行氣除滿，開胸除痹之功效。瓜蔞皮注射液臨床應用廣泛，但物質基礎尚不明確。

目前對瓜蔞皮的化學成分研究也主要集中在小分子上，如從瓜蔞皮中分離出脂肪酸、甾醇、黃酮、氨基酸、核苷酸和生物堿成分，但瓜蔞皮多糖類成分卻鮮有報道。

腎素-血管緊張素系統(RAS)是一種參與調節血壓和體液電解質平衡的內分泌系統，腎素抑制劑能夠直接從源頭上阻斷RAS，有效減少AngI、AngII的生成，在抗高血壓作用的同時可以顯著抑制動脈粥樣硬化和冠心病的進展，促進斑塊的穩定，同時像阿利吉侖等腎素抑制劑在降低新功能不全、改善心室肥厚和緩解心絞痛等方面發揮重要作用。

發明內容

根據現有技術中存在的上述問題，本發明將瓜蔞皮按照瓜蔞皮注射液國家藥品標準進行提取，并以抗腎素活性跟蹤為前提，對透析截留后的袋內大分子部分進行活性跟蹤分離純化和結構分析，為闡明瓜蔞皮注射液的化學物質基礎提供依據。

本發明提供了一種瓜蔞皮多糖GLP-5-1，其單糖組成包括阿拉伯糖、巖藻糖、葡萄糖和半乳糖組成，四種單糖的摩爾比為：(4.5～6.5):(4～6):(6～8):(8～12)；優選的，四種單糖的摩爾比為：5.5:4.4:6.9:10.0。

所述的瓜蔞皮多糖GLP-5-1，其相對平均分子量為2000～10000Da；優選為2000～4500Da，進一步優選為3722Da。

本發明還提供了所述的瓜蔞皮多糖GLP-5-1的制備方法，其包括如下步驟：

(1)取瓜蔞皮，加水煎煮，收集濾液，減壓濃縮后加入乙醇，靜置后取上清液，濾過，干燥得浸膏；

(2)浸膏經透析后收集袋內部分，干燥后得到樣品GLP；

(3)樣品GLP過陰離子交換樹脂，用水、0.1M、0.2M、0.5M和1.0MNaCl依次洗脫，其中0.5M洗脫組分得GLP-5；

(4)將洗脫組分GLP-5以0.2M NaCl為流動相，經分子篩凝膠柱層析，得瓜蔞皮多糖GLP-5-1。

其中，

步驟(1)所述乙醇的質量分數優選為80～95％，更優選為90％；加入乙醇后，濾液中的含醇量優選為60～75％，更優選為70％；

步驟(2)所述透析優選使用截留分子量1000Da的透析袋透析；

步驟(3)所述陰離子交換樹脂為DEAE Sepharose Fast Flow陰離子交換樹脂；

步驟(4)所述分子篩凝膠柱層析為Superdex 75分子篩凝膠柱層析；

步驟(1)和步驟(2)中的干燥為冷凍干燥。

作為一個優選的制備方法，其包括如下步驟：