[發明專利]一種同時分析分離甲磺酸瑞波西汀蘇式異構體及硝基苯甲酰氧基苯基丙烷化合物的方法

在審

• 申請號: 201710157979.7
• 申請日: 2017-03-16
• 公開（公告）號: CN107014914A
• 公開（公告）日: 2017-08-04
• 發明（設計）人: 李艷;何靜;唐倩;楊宗發;張亞紅;林鳳云;王麗娟;曾雪
• 申請（專利權）人: 重慶醫藥高等?？茖W校
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 重慶強大凱創專利代理事務所(普通合伙)50217
• 代理人: 黃書凱,文怡然

技術領域

本發明涉及一種高效液相色譜方法，具體涉及一種同時分析分離甲磺酸瑞波西汀蘇式異構體及硝基苯甲酰氧基苯基丙烷化合物的方法。

背景技術

甲磺酸瑞波西汀由Pharmacia&Upjolm公司開發，于1977年在英國首次上市，目前在歐盟、美國等世界40多個國家上市，也是第一個上市用于治療抑郁癥的選擇性去甲腎上腺素(NA)再攝取抑制劑。甲磺酸瑞波西汀對去甲腎上腺素再攝取抑制作用有高度的選擇性，對其他神經遞質和受體幾乎沒有影響，能增強去甲腎上腺素在突觸的有效性，減少去甲腎上腺素的傳導。臨床研究表明，本品治療抑郁癥，尤其是重抑郁癥相當有效，同時耐受性良好，不良反應少。進入二十一世紀后，隨著人們生活節奏日益緊張，抑郁癥人群日益增多，甲磺酸瑞波西汀作為治療抑郁癥藥物的應用也日益廣泛。

甲磺酸瑞波西汀，化學名：[(2-乙氧基苯氧基)苯甲基]嗎啉甲磺酸鹽，其化學結構式如下：

甲磺酸瑞波西汀分子中有兩個不同的手性中心，所以它有四個光學異構體。其中，具有抗抑郁活性的是一對赤式消旋體(2R，3R)、(2S，3S)，本文所指主成分甲磺酸瑞波西汀即指具有抗抑郁活性的赤式消旋體。而其蘇式異構體(2R，3S)、(2S，3R)卻并無抗抑郁活性。瑞波西汀四個異構體結構如下：

在甲磺酸瑞波西汀原料合成過程中，由于國內各企業合成工藝路線及工藝水平不同，難免產生蘇式異構體副產物及其他中間體雜質，如硝基苯甲酰氧基苯基丙烷化合物等，因此，控制甲磺酸瑞波西汀中蘇式異構體及相關中間體雜質含量，是控制甲磺酸瑞波西汀質量的關鍵。

發明內容

本發明的目的在于提供一種同時分析分離甲磺酸瑞波西汀蘇式異構體及硝基苯甲酰氧基苯基丙烷化合物的方法，該分析分離方法能同時將蘇式異構體及硝基苯甲酰氧基苯基丙烷化合物分析分離，從而保證甲磺酸瑞波西汀的質量。

為達到上述目的，本發明的基礎方案如下：

一種同時分析分離甲磺酸瑞波西汀蘇式異構體及硝基苯甲酰氧基苯基丙烷化合物的方法，采用高效液相色譜儀，以0.01mol/L磷酸二氫鉀溶液-甲醇為第一流動相，以甲醇為第三流動相，采用梯度洗脫，梯度洗脫程序如下：

(1)在0-20min內，采用第一流動相進行洗脫；

(2)在20-38min內，采用第一流動相、第三流動相進行洗脫，第一流動相的比例連續、均勻地從100％開始減少，第三流動相的比例連續、均勻地從0％開始增加，最終使第一流動相、第三流動相的體積比為0.9-1.1:5；

(3)在38-43min內，采用第一流動相、第三流動相進行洗脫，所用的第一流動相、第三流動相的體積比為0.9-1.1:5；

(4)在43-43.1min內，采用第一流動相、第三流動相進行洗脫，第一流動相的比例連續、均勻地增加至100％，第三流動相的比例連續、均勻地降至0％；

(5)在43.1-53min內，采用第一流動相進行洗脫。

按體積計，第一流動相中磷酸二氫鉀溶液/甲醇為50-55:48；梯度洗脫的流速為0.9-1.1ml/min。

經梯度洗脫后進行檢測，具體操作步驟如下：

(1)配制供試品溶液：取甲磺酸瑞波西汀樣品，加第一流動相溶解并稀釋制成每1ml中含甲磺酸瑞波西汀1-1.2mg；

(2)配制對照溶液：量取供試品溶液1ml，用第一流動相將供試品溶液稀釋至100ml，即為對照溶液；

(3)配制對照品溶液：取甲磺酸瑞波西汀蘇式異構體對照品及硝基苯甲酰氧基苯基丙烷化合物對照品各適量，分別加第一流動相溶解，稀釋制成每1ml中含蘇式異構體5-6μg，硝基苯甲酰氧基苯基丙烷化合物3μg的溶液，即為對照品溶液；

(4)配制系統適用性溶液：取甲磺酸瑞波西汀對照品、蘇式異構體對照品及硝基苯甲酰氧基苯基丙烷化合物對照品各適量，分別加第一流動相溶解，分別稀釋制成每1ml中含甲磺酸瑞波西汀1-1.2mg，蘇式異構體5μg，硝基苯甲酰氧基苯基丙烷化合物3μg的溶液，即為系統適用性溶液；

(5)量取系統適用性溶液20μl注入液相色譜儀，觀察甲磺酸瑞波西汀峰、蘇式異構體峰、硝基苯甲酰氧基苯基丙烷化合物峰之間的分離度，理論板數按甲磺酸瑞波西汀峰計算應不低于1000；

(6)量取供試品溶液、對照溶液與對照品溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。