[發明專利]一種高效的痕量臨床病人樣本的高通量全蛋白組學定量分析方法在審
| 申請號： | 201710155263.3 | 申請日： | 2017-03-10 |
| 公開（公告）號： | CN106885858A | 公開（公告）日： | 2017-06-23 |
| 發明（設計）人： | 方雷;阮錦滿 | 申請（專利權）人： | 方雷 |
| 主分類號： | G01N30/02 | 分類號： | G01N30/02;G01N30/72;G01N30/06;G01N30/14;G01N33/68 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 210046 江蘇省南京市棲*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 高效 痕量 臨床 病人 樣本 通量 蛋白組 定量分析 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種高效的痕量臨床病人樣本的高通量全蛋白組學定量分析方法，其特征是利用iTRAQ技術高效分析痕量的臨床病人樣本，高通量的實現全蛋白質組定量和比較，篩選出疾病相關蛋白和標志物。
2.根據權利要求1所述的高通量全蛋白組學定量分析方法，其特征是利用非接觸式超聲破碎提取痕量組織樣本總蛋白。
3.根據權利要求1所述的高通量全蛋白組學定量分析方法，其特征是對痕量臨床病人樣本肽段進行iTRAQ標記并聯合HPLC分級。
4.根據權利要求1所述的高通量全蛋白組學定量分析技術，其特征是包括以下步驟：
將獲得的臨床病人組織根據需要進行激光顯微切割，獲取痕量的相同大小的組織；
將痕量病人組織采用非接觸式超聲破碎提取總蛋白；
將獲得的蛋白進行還原烷基化，并進行胰蛋白酶酶解，收集酶解肽段脫鹽后取微量肽段進行質譜分析，根據肽段數量對不同組蛋白的濃度完成相對定量；
對不同組病人樣品按照流程進行iTRAQ試劑的標記，并真空抽干后進行痕量樣品的HPLC預分級；
將HPLC分級獲得的肽段提交到在線二維液相色譜質譜聯用系統進行全蛋白質組學定量分析；
通過生物信息學工具分析，高通量高準確度的篩選和確認疾病標志物和治療靶點蛋白，實現精準醫學疾病診斷。
5.根據權利要求1所述的一種高效的痕量臨床病人樣本的高通量全蛋白組學定量分析技術在蛋白質疾病標志物的篩選和疾病臨床診斷中的應用。
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