[發明專利]一種枸杞葉低聚糖及酸性多糖的制備方法及應用

有效

• 申請號: 201710152239.4
• 申請日: 2017-03-15
• 公開（公告）號: CN106883275B
• 公開（公告）日: 2019-08-13
• 發明（設計）人: 劉富崗
• 申請（專利權）人: 河南中醫藥大學
• 主分類號: C07H1/08
• 分類號: C07H1/08;C07H3/04;C07H3/06;A61P35/00;A61P31/04;C08B37/00
• 代理公司: 北京卓特專利代理事務所(普通合伙) 11572
• 代理人: 段宇

本發明涉及一種枸杞葉低聚糖及酸性多糖的制備方法及應用，將超微粉碎技術應用于枸杞葉低聚糖及酸性多糖的提取大大提高了枸杞葉低聚糖及酸性多糖的提取效率和藥材利用率，有效解決了枸杞葉低聚糖及酸性多糖的一體化高效制備問題；本發明制備的枸杞葉低聚糖可有效用于制備抗菌類藥物或保健品，枸杞葉酸性多糖Ⅰ和枸杞葉酸性多糖Ⅱ有效用于制備抗腫瘤的藥物。

技術領域

本發明涉及醫藥領域，特別是涉及一種枸杞葉低聚糖及酸性多糖的制備方法及應用。

背景技術

枸杞葉為燕科植物寧夏枸杞Lycium barbarum L.的干燥葉，俗稱天精草，《本草綱目》稱其有“除煩益志補五勞七傷，壯心氣，除熱毒,散瘡腫，除風明目”的功效，目前研究表明其主要含有黃酮類化合物、生物堿、多糖、氨基酸、微量元素、維生素、萜類等化合物，對其藥理作用的研究主要集中在降血糖、降血脂、耐缺氧、抗氧化、降血壓、抗疲勞、耐低溫、延緩衰老、抗腫瘤等作用，其抗腫瘤作用主要為枸杞葉總黃酮對人肝癌細胞HepG2增殖與凋亡的影響，而對枸杞葉中的酸性多糖研究較少，尤其對其中的枸杞葉低聚糖未見公開報道，并且如何解決一體化制備枸杞葉低聚糖及酸性多糖也未見公開報道。

發明內容

針對上述情況，為克服現有技術之缺陷，本發明的目的就是提供一種枸杞葉低聚糖及酸性多糖的制備方法，可有效解決枸杞葉低聚糖及酸性多糖的制備問題及枸杞葉低聚糖在制備具有抗菌作用的藥物或保健品中的應用和枸杞葉酸性多糖Ⅰ及枸杞葉酸性多糖Ⅱ在制備抗腫瘤的藥物中的應用的問題。

本發明解決的技術方案是，一種枸杞葉低聚糖及酸性多糖的制備方法，包括以下步驟：

（1）取枸杞葉，加8-15倍量的冷水浸泡2分鐘，過濾，藥渣50℃干燥，粉碎成粉體粒徑D90值為11.5μm-38.6μm的超微粉A，加超微粉A重量8.5倍的乙醚浸泡2h-7h，過濾，藥渣揮盡乙醚，加超微粉A重量8倍量的無水乙醇浸泡0.5h-2.5h，76℃回流提取1.1h-2.5h，過濾，藥渣揮盡乙醇加超微粉A 重量8-15倍量的體積濃度為71%-82%乙醇，80℃回流提取3h，過濾，藥渣揮盡溶劑作為藥渣B備用，濾液減壓回收溶劑，45℃減壓濃縮成比重為1.10-1.18的浸膏，依次通過活性炭柱、AB-8型大孔吸附樹脂柱、Sephadex LH-20凝膠柱，洗脫液減壓濃縮成比重為1.10-1.15的浸膏，冷凍干燥得枸杞葉低聚糖；

（2）取步驟（1）中的藥渣B，加超微粉A重量10-18倍量的0.1mol/L的NaOH溶液，靜置4h，85℃回流提取3h，過濾，濾液減壓回收溶劑至比重為1.08-1.13的浸膏，加7mol/L的HCl溶液調節pH至3.5，5000r/min離心30min，上清液加乙醇至含醇量為30%（v/v），6000r/min離心16min，得上清液C備用，下層沉淀揮盡乙醇，用沉淀3倍重量的蒸餾水分3次洗滌沉淀，再加沉淀10-15倍重量的0.01mol/L的NaOH溶液使溶解，加1mol/L的HCl溶液調節pH至7.3，6000r/min離心25min，分取上層清液加乙醇使含醇量達到35%（v/v），2℃-4℃靜置12h，過濾，沉淀冷凍干燥得枸杞葉酸性粗多糖Ⅰ；取上清液C，加乙醇使含醇量達到80%（v/v），4℃靜置12h，過濾，沉淀以超微粉A重量的蒸餾水分3次洗滌，冷凍干燥得枸杞葉酸性粗多糖Ⅱ；取枸杞葉酸性粗多糖Ⅰ加10倍重量蒸餾水使溶解，三氯乙酸法脫蛋白，再依次通過HPD-300型大孔吸附樹脂柱、Sephadex G-200凝膠樹脂柱，得洗脫液，最后將所得洗脫液冷凍干燥得枸杞葉酸性多糖Ⅰ；取枸杞葉酸性粗多糖Ⅱ加10倍重量蒸餾水使溶解，三氯乙酸法脫蛋白，再依次通過HPD-600型大孔吸附樹脂柱、Sephadex G-100凝膠樹脂柱，得洗脫液，最后將所得洗脫液冷凍干燥得枸杞葉酸性多糖Ⅱ；本發明實現了枸杞葉為原料制備枸杞葉低聚糖及枸杞葉酸性多糖Ⅰ和酸性多糖Ⅱ，并將枸杞葉低聚糖有效用于制備抗菌藥物或保健品中的應用，將枸杞葉酸性多糖Ⅰ和酸性多糖Ⅱ有效用于制備抗腫瘤的藥物中的應用。