[發明專利]一種枸杞葉低聚糖及酸性多糖的制備方法及應用有效
| 申請號： | 201710152239.4 | 申請日： | 2017-03-15 |
| 公開（公告）號： | CN106883275B | 公開（公告）日： | 2019-08-13 |
| 發明（設計）人： | 劉富崗 | 申請（專利權）人： | 河南中醫藥大學 |
| 主分類號： | C07H1/08 | 分類號： | C07H1/08;C07H3/04;C07H3/06;A61P35/00;A61P31/04;C08B37/00 |
| 代理公司： | 北京卓特專利代理事務所(普通合伙) 11572 | 代理人： | 段宇 |
| 地址： | 450046 河南*** | 國省代碼： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 枸杞 聚糖 酸性 多糖 制備 方法 應用 | ||
1.一種枸杞葉低聚糖及酸性多糖的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)取枸杞葉，加8-15倍量的冷水浸泡2分鐘，過濾，藥渣50℃干燥，粉碎成粉體粒徑D90值為11.5μm-38.6μm的超微粉A，加超微粉A重量8.5倍的乙醚浸泡2h-7h，過濾，藥渣揮盡乙醚，加超微粉A重量8倍量的無水乙醇浸泡0.5h-2.5h，76℃回流提取1.1h-2.5h，過濾，藥渣揮盡乙醇加超微粉A重量8-15倍量的體積濃度為71％-82％乙醇，80℃回流提取3h，過濾，藥渣揮盡溶劑作為藥渣B備用，濾液減壓回收溶劑，45℃減壓濃縮成比重為1.10-1.18的浸膏，依次通過活性炭柱、AB-8型大孔吸附樹脂柱、Sephadex LH-20凝膠柱，洗脫液減壓濃縮成比重為1.10-1.15的浸膏，冷凍干燥得枸杞葉低聚糖；
(2)取步驟(1)中的藥渣B，加超微粉A重量10-18倍量的0.1mol/L的NaOH溶液，靜置4h，85℃回流提取3h，過濾，濾液減壓回收溶劑至比重為1.08-1.13的浸膏，加7mol/L的HCl溶液調節pH至3.5，5000r/min離心30min，上清液加乙醇至乙醇體積濃度為30％，6000r/min離心16min，得上清液C備用，下層沉淀揮盡乙醇，用沉淀3倍重量的蒸餾水分3次洗滌沉淀，再加沉淀10-15倍重量的0.01mol/L的NaOH溶液使溶解，加1mol/L的HCl溶液調節pH至7.3，6000r/min離心25min，分取上層清液加乙醇至乙醇體積濃度為35％，2℃-4℃靜置12h，過濾，沉淀冷凍干燥得枸杞葉酸性粗多糖Ⅰ；取上清液C，加乙醇至乙醇體積濃度為80％，4℃靜置12h，過濾，沉淀以超微粉A重量的蒸餾水分3次洗滌，冷凍干燥得枸杞葉酸性粗多糖Ⅱ；取枸杞葉酸性粗多糖Ⅰ加10倍重量蒸餾水使溶解，三氯乙酸法脫蛋白，再依次通過HPD-300型大孔吸附樹脂柱、Sephadex G-200凝膠樹脂柱，得洗脫液，最后將所得洗脫液冷凍干燥得枸杞葉酸性多糖Ⅰ；取枸杞葉酸性粗多糖Ⅱ加10倍重量蒸餾水使溶解，三氯乙酸法脫蛋白，再依次通過HPD-600型大孔吸附樹脂柱、Sephadex G-100凝膠樹脂柱，得洗脫液，最后將所得洗脫液冷凍干燥得枸杞葉酸性多糖Ⅱ。
2.根據權利要求1所述的一種枸杞葉低聚糖及酸性多糖的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：(1)取枸杞葉，加8倍量的冷水浸泡2分鐘，過濾，藥渣50℃干燥，粉碎成粉體粒徑D90值為11.5μm-38.6μm的超微粉A，加超微粉A重量8.5倍的乙醚浸泡2h，過濾，藥渣揮盡乙醚，加超微粉A重量8倍量的無水乙醇浸泡0.5h，76℃回流提取1.1h，過濾，藥渣揮盡乙醇加超微粉A重量8倍量的體積濃度為71％乙醇，80℃回流提取3h，過濾，藥渣揮盡溶劑作為藥渣B備用，濾液減壓回收溶劑，45℃減壓濃縮成比重為1.10的浸膏，依次通過活性炭柱、AB-8型大孔吸附樹脂柱、Sephadex LH-20凝膠柱，洗脫液減壓濃縮成比重為1.10的浸膏，冷凍干燥得枸杞葉低聚糖；
(2)取步驟(1)中的藥渣B，加超微粉A重量10倍量的0.1mol/L的NaOH溶液，靜置4h，85℃回流提取3h，過濾，濾液減壓回收溶劑至比重為1.08的浸膏，加7mol/L的HCl溶液調節pH至3.5，5000r/min離心30min，上清液加乙醇至乙醇體積濃度為30％，6000r/min離心16min，得上清液C備用，下層沉淀揮盡乙醇，用沉淀3倍重量的蒸餾水分3次洗滌沉淀，再加沉淀10倍重量的0.01mol/L的NaOH溶液使溶解，加1mol/L的HCl溶液調節pH至7.3，6000r/min離心25min，分取上層清液加乙醇至乙醇體積濃度為35％，2℃-4℃靜置12h，過濾，沉淀冷凍干燥得枸杞葉酸性粗多糖Ⅰ；取上清液C，加乙醇至乙醇體積濃度為80％，4℃靜置12h，過濾，沉淀以超微粉A重量的蒸餾水分3次洗滌，冷凍干燥得枸杞葉酸性粗多糖Ⅱ；取枸杞葉酸性粗多糖Ⅰ加10倍重量蒸餾水使溶解，三氯乙酸法脫蛋白，再依次通過HPD-300型大孔吸附樹脂柱、Sephadex G-200凝膠樹脂柱，得洗脫液，最后將所得洗脫液冷凍干燥得枸杞葉酸性多糖Ⅰ；取枸杞葉酸性粗多糖Ⅱ加10倍重量蒸餾水使溶解，三氯乙酸法脫蛋白，再依次通過HPD-600型大孔吸附樹脂柱、Sephadex G-100凝膠樹脂柱，得洗脫液，最后將所得洗脫液冷凍干燥得枸杞葉酸性多糖Ⅱ。
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