[發明專利]一種石松植株再生的快速繁殖方法

在審

• 申請號: 201710148973.3
• 申請日: 2017-03-14
• 公開（公告）號: CN108566887A
• 公開（公告）日: 2018-09-25
• 發明（設計）人: 于霞
• 申請（專利權）人: 南京標科生物科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明研究了一種石松植株再生的快速繁殖方法，包括無菌孢子的獲得，愈傷組織的誘導，愈傷組織的分化，生根誘導、煉苗移栽等步驟。本研究通過建立石松離體再生體系，獲得了石松繁殖的新途徑，克服了石松自然繁殖困難的缺點，有利于石松在我國短期內的大量推廣種植。

技術領域

本發明涉及植物組織培養的快繁方法，屬于植物技術領域。

背景技術

石松，Lycopodium japonicum Thunb，別名伸筋草、過山龍、寬筋藤等，石松科，為多年生草本植物，是一種名貴中藥材。其莖直立，為二歧式分枝，葉為小型葉，多為針狀，葉的基部膨大，在莖、枝的表面留下的印痕叫葉座。它生長于海拔3000m左右的高山草甸，低海拔林緣、疏林下，路邊、山坡及草從間。喜溫暖濕潤，耐蔭、耐旱、不抗嚴寒。主要分布在中國臺灣、湖北、四川、云南、西藏等地。其具有很好的藥用價值，主治：祛風除濕、通經活絡、消腫止痛、風濕腰腿痛、關節疼痛、屈伸不利、跌打損傷、刀傷、燙火傷。性味與歸經：微苦、辛，溫。歸肝、脾、腎經，石松的繁殖困難，主要是孢子繁殖。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供石松植株再生的快速繁殖方法，本研究通過建立石松離體再生體系，獲得了石松繁殖的新途徑，克服了石松繁殖困難的缺點，有利于石松在我國短期內的推廣種植。

本發明所要解決的技術問題是通過以下方案來實現的：

取石松幼嫩的孢子，洗衣粉中浸泡3min，流水沖洗20min，超凈工作臺上0.005mol/L的氨水中浸泡10min，無菌水沖洗5次，消毒處理過的石松孢子，接入培養基為REG+NOA0.1mg/L+6-BA3mg/L+三醋酸腈1-1.5mg/L進行愈傷組織誘導，附加瓊脂粉6.8g/L，D-葡萄糖水溶液0.025mol/L，培養條件暗培養，溫度21±2℃，誘導出來的愈傷組織放入分化培養基REG+ZT1mg/L+TDZ0.05mg/L+L-脯氨酸2mg/L，附加瓊脂粉6.8g/L，D-葡萄糖水溶液0.025mol/L，培養條件光照1600lx，光期12h/d，溫度23±2℃，分化培養出來的石松芽苗放入培養基1/4MS+ABT6號生根粉0.3-0.4mg/L+NAA0.3mg/L培養基中進行生根誘導，附加瓊脂粉5.5g/L，D-葡萄糖水溶液0.045mol/L，培養條件光照3000lx，光期14h/d，溫度23±2℃，芽條轉入生根培養基中后先在室內弱光條件下培養15天左右，發根率到60%時搬到室外煉苗大棚在自然散射光照培養15天，待生根小苗充分木質化，葉片舒展，葉色濃綠，倒出培養基，取出小苗，用水洗凈殘留在根上的培養基，截去過長的根系，移栽于裝有腐殖土的營養袋中，覆蓋薄膜，保持溫度25℃，濕度90%，并避免陽光直射。

本發明方法采用石松孢子作為繁殖材料，制備出來的石松遺傳穩定性好，繁殖系數大，操作過程中污染少，能耗小。

下面將結合具體實施方式對本發明作進一步闡述，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

具體實施方式

實施例1