[發(fā)明專利]一種石松植株再生的快速繁殖方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201710148973.3
• 申請日: 2017-03-14
• 公開（公告）號: CN108566887A
• 公開（公告）日: 2018-09-25
• 發(fā)明（設計）人: 于霞
• 申請（專利權）人: 南京標科生物科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.本發(fā)明研究了一種石松植株再生的快速繁殖方法，包括無菌孢子的獲得，愈傷組織的誘導，愈傷組織的分化，生根誘導，煉苗移栽等，其主要步驟如下：

（1）取石松的孢子進行消毒處理；

（2）將步驟（1）消毒處理過的石松孢子，接入培養(yǎng)基為REG+NOA0.1mg/L+6-BA3mg/L+三醋酸腈1-1.5mg/L進行愈傷組織誘導，附加瓊脂粉6.8g/L，D-葡萄糖水溶液0.025mol/L，培養(yǎng)條件暗培養(yǎng)，溫度21±2℃；

（3）取步驟（2）誘導出來的愈傷組織放入分化培養(yǎng)基REG+ZT1mg/L+TDZ0.05mg/L+L-脯氨酸2mg/L，附加瓊脂粉6.8g/L，D-葡萄糖水溶液0.025mol/L，培養(yǎng)條件光照1600lx，光期12h/d，溫度23±2℃；

（4）取步驟（3）分化培養(yǎng)出來的石松芽苗放入培養(yǎng)基1/4MS+ABT6號生根粉0.3-0.4mg/L+NAA0.3mg/L培養(yǎng)基中進行生根誘導，附加瓊脂粉5.5g/L，D-葡萄糖水溶液0.045mol/L，培養(yǎng)條件光照3000lx，光期14h/d，溫度23±2℃；

（5）取步驟（4）生根后的石松進行煉苗移栽。

2.按照權利要求1所述的一種石松植株再生的快速繁殖方法，其特征在于：步驟（1）中所述石松孢子的消毒處理為，取石松幼嫩的孢子，洗衣粉中浸泡3min，流水沖洗20min，超凈工作臺上0.005mol/L的氨水中浸泡10min，無菌水沖洗5次。

3.按照權利要求1所述的一種石松植株再生的快速繁殖方法，其特征在于：步驟（2）、步驟（3）、步驟（4）培養(yǎng)基中加入的三醋酸腈、L-脯氨酸和ABT6號生根粉皆不耐高溫，需要在接種前采用過濾滅菌的方法接入培養(yǎng)基中。

4.按照權利要求1所述的一種石松植株再生的快速繁殖方法，其特征在于：步驟（4）中芽條轉入生根培養(yǎng)基中后先在室內(nèi)弱光條件下培養(yǎng)15天左右，發(fā)根率到60%時搬到室外煉苗大棚在自然散射光照培養(yǎng)15天。

5.按照權利要求1所述的一種石松植株再生的快速繁殖方法，其特征在于：步驟（5）中待生根小苗充分木質化，葉片舒展，葉色濃綠，倒出培養(yǎng)基，取出小苗，用水洗凈殘留在根上的培養(yǎng)基，截去過長的根系，移栽于裝有腐殖土的營養(yǎng)袋中，覆蓋薄膜，保持溫度25℃，濕度90%，并避免陽光直射。