[發(fā)明專利]創(chuàng)新霉素生物合成基因簇及其應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201710146841.7 | 申請日: | 2017-03-13 |
| 公開(公告)號: | CN106754986B | 公開(公告)日: | 2020-05-08 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 卞小瑩;張友明;許曉坤 | 申請(專利權(quán))人: | 山東大學(xué)蘇州研究院;山東大學(xué) |
| 主分類號: | C12N15/52 | 分類號: | C12N15/52;C12N9/00;C12P17/18 |
| 代理公司: | 濟(jì)南圣達(dá)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37221 | 代理人: | 李健康 |
| 地址: | 215000 江蘇省蘇州*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 創(chuàng)新 霉素 生物 合成 基因 及其 應(yīng)用 | ||
1.一種創(chuàng)新霉素的生物合成基因簇,其特征在于,所述基因簇的核苷酸序列如SEQ IDNo.1所示,命名為cxm;其包含編碼創(chuàng)新霉素生物合成所涉及的10個基因,其中7個是與生物合成相關(guān)基因,1個是調(diào)控基因,1個抗性基因,1個是轉(zhuǎn)運(yùn)基因,所述基因的核苷酸序列如SEQ ID No.2 ~ SEQ ID No.11所示,具體是:
(1)抗性蛋白基因,該基因的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示,命名為cxm0,其位于基因簇核苷酸序列第1-840個堿基處,長度為840個堿基對,編碼一個色氨酰tRNA合成酶,279個氨基酸,序列如SEQ ID No.12所示;
(2)轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白基因,該基因的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示,命名為Cxm1,其位于基因簇核苷酸序列第1177-2118個堿基處,長度為942個堿基對,編碼一個LysR家族轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白,313個氨基酸,序列如SEQ ID No.13所示;
(3)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因,該基因的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示,命名為Cxm2,其位于基因簇核苷酸序列第2463-3905個堿基處,長度為1443個堿基對,編碼一個轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,480個氨基酸,序列如SEQ ID No.14所示;
(4)巰基轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(sulfur carrier protein)激活蛋白基因,該基因的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示,命名為cxm3,其位于基因簇核苷酸序列第4070-4690個堿基處,長度為621個堿基對,編碼一個功能未知蛋白,206個氨基酸,序列如SEQ ID No.15所示;
(5)巰基轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(sulfur carrier protein)基因,該基因的核苷酸序列如SEQ IDNo.6所示,命名為cxm4
(6)細(xì)胞色素P450酶基因,該基因的核苷酸序列如SEQ ID No.7所示,命名為cxm5,其位于基因簇核苷酸序列第4993-6207個堿基處,長度為1215個堿基對,編碼一個細(xì)胞色素P450酶,404個氨基酸,序列如SEQ ID No.17所示;
(7)酮泛解酸還原酶基因,該基因的核苷酸序列如SEQ ID No.8所示,命名為cxm6,其位于基因簇核苷酸序列第6234-7160個堿基處,長度為927個堿基對,編碼一個細(xì)胞色素P450酶,308個氨基酸,序列如SEQ ID No.18所示;
(8)5-磷酸吡哆醛(PLP)依賴型氨基轉(zhuǎn)移酶基因,該基因的核苷酸序列如SEQ ID No.9所示,命名為cxm7,其位于基因簇核苷酸序列第7157-8245個堿基處,長度為1089個堿基對,編碼一個PLP依賴型氨基轉(zhuǎn)移酶,362個氨基酸,序列如SEQ ID No.19所示;
(9)自由基S-腺苷甲硫氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶基因,該基因的核苷酸序列如SEQ ID No.10所示,命名為cxm8,其位于基因簇核苷酸序列第8318-10189個堿基處,長度為1872個堿基對,編碼一個自由基S-腺苷甲硫氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶,623個氨基酸,序列如SEQ ID No.20所示;
(10)自由基S-腺苷甲硫氨酸蛋白基因,該基因的核苷酸序列如SEQ ID No.11所示,命名為cxm9,其位于基因簇核苷酸序列第10186-10917個堿基處,長度為732個堿基對,編碼一個自由基S-腺苷甲硫氨酸蛋白,243個氨基酸,序列如SEQ ID No.21所示。
2.權(quán)利要求1所述創(chuàng)新霉素的生物合成基因簇表達(dá)的編碼蛋白。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的編碼蛋白,其特征在于,所述編碼蛋白的氨基酸序列分別如SEQ ID No.12~SEQ ID No.21所示。
4.權(quán)利要求1所述創(chuàng)新霉素的生物合成基因簇或權(quán)利要求2所述創(chuàng)新霉素的生物合成基因簇表達(dá)的編碼蛋白在催化合成創(chuàng)新霉素中的應(yīng)用。
5.一種重組載體,其特征在于,該重組載體包含權(quán)利要求1所述的創(chuàng)新霉素生物合成基因簇。
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