[發明專利]快速鑒定光皮梾木種群的分子檢測方法

有效

• 申請號: 201710142227.3
• 申請日: 2017-03-10
• 公開（公告）號: CN106967793B
• 公開（公告）日: 2020-12-11
• 發明（設計）人: 王明懷;林軍;黃金華;張良波;張應中;徐煲鏵;張紹勛;鄺兆勇;鄧文劍;葉代全;何禎祥
• 申請（專利權）人: 廣東省林業科學研究院
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 萬志香

1.一種快速鑒定光皮梾木種群的分子檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）、以光皮梾木的DNA作為模板，分別以SEQ ID No:1~2、SEQ ID No:3~4、SEQ ID No:5~6、SEQ ID No:7~8、SEQ ID No:9~10、SEQ ID No:11~12、SEQ ID No:13~14、SEQ ID No:15~16、SEQ ID No:17~18、SEQ ID No:19~20、SEQ ID No:21~22、SEQ ID No:23~24、SEQ ID No:25~26、SEQ ID No:27~28、以及SEQ ID No:29~30作為引物對，進行PCR擴增，獲得微衛星分子標記數據；

（2）、對上述微衛星分子標記數據進行統計分析，鑒定歸類光皮梾木種群。

2.根據權利要求1所述的快速鑒定光皮梾木種群的方法，其特征在于，步驟(1)中所述PCR擴增的反應程序為：

步驟S1，94℃下預變性5min；

步驟S2，94℃下變性30s；

步驟S3，57℃下退火30s；

步驟S4，72℃下延伸20s；

步驟S5，將所述步驟S2至所述步驟S4重復35次，且最后一次的所述步驟S4持續10min。

3.根據權利要求1所述的快速鑒定光皮梾木種群的方法，其特征在于，步驟(1)中所述PCR擴增的反應體系為：DNA模板1.0μL、引物對0.2μL、Mix 10μL，加ddH₂O至20μL。

4.根據權利要求3所述的快速鑒定光皮梾木種群的方法，其特征在于，所述Mix包括Taq酶，dNTPs和緩沖液。

5.根據權利要求1至4任一項所述的快速鑒定光皮梾木種群的方法，其特征在于，所述統計分析采用的軟件為非商業化GenAlEx 6 .503軟件。

6.根據權利要求1至4任一項所述的快速鑒定光皮梾木種群的方法，其特征在于，所述DNA提取自葉片。

7.一種快速鑒定光皮梾木種群的引物對，其特征在于，所述引物對包括SEQ ID No:1~2、SEQ ID No:3~4、SEQ ID No:5~6、SEQ ID No:7~8、SEQ ID No:9~10、SEQ ID No:11~12、SEQ ID No:13~14、SEQ ID No:15~16、SEQ ID No:17~18、SEQ ID No:19~20、SEQ ID No:21~22、SEQ ID No:23~24、SEQ ID No:25~26、SEQ ID No:27~28、以及SEQ ID No:29~30。