[發(fā)明專利]一種針對興安天門冬的組培快繁方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710141841.8
• 申請日: 2017-03-10
• 公開（公告）號: CN106942053B
• 公開（公告）日: 2019-04-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 周勁松;陳光宇;湯泳萍;羅紹春;張岳平;謝啟鑫;尹玉玲
• 申請（專利權(quán)）人: 江西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 南昌新天下專利商標(biāo)代理有限公司 36115
• 代理人: 劉華

本發(fā)明提供了一種針對興安天門冬的組培快繁方法，該技術(shù)方案包括取材與外植體消毒、腋芽誘導(dǎo)培養(yǎng)、根叢誘導(dǎo)培養(yǎng)、根叢增殖培養(yǎng)、生根預(yù)分化培養(yǎng)、生根培養(yǎng)以及組培苗移栽等過程。本發(fā)明采用根叢繁殖途徑，有別于常規(guī)的單莖繁殖生根或愈傷途徑；以根叢作為目標(biāo)繁殖單位，以及后續(xù)誘導(dǎo)生根部位，促進生根，提高組培苗的繁殖系數(shù)與整齊度。同時，本發(fā)明采用蔗糖濃度由低到高的兩段生根法促進生根，并重點添加適當(dāng)濃度的嘧啶醇促進根的發(fā)育，有效解決了興安天門冬生根困難問題，整個周期8～12月，生根率超過60％，在誘導(dǎo)率、生根率、根的質(zhì)量、移栽成活率等方面達到植物組培快繁要求，為興安天門冬保存與利用奠定了基礎(chǔ)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，進一步涉及植物的組織培養(yǎng)和快速繁殖技術(shù)，具體涉及一種針對興安天門冬的組培快繁方法。

背景技術(shù)

興安天門冬(Asparagus dauricus Fisch.ex Link)，屬百合科天門冬屬多年生草本植物。研究發(fā)現(xiàn)，它雌雄異株，矮生性，嫩莖抽生多，高抗蘆筍莖枯病，具有很多蘆筍栽培種所亟需的優(yōu)異性狀，是蘆筍重要的近緣種質(zhì)。由于興安天門冬種子萌發(fā)性差，通過分蔸法繁殖效率低，為了更好開發(fā)興安天門冬，利用其優(yōu)異性狀改良蘆筍，很有必要建立興安天門冬組織培養(yǎng)快繁體系。

目前國內(nèi)外均未見興安天門冬組織培養(yǎng)和快繁技術(shù)研究的報道。但在天門冬屬內(nèi)，蘆筍(Asparagus officinalis L.)研究最為深入，現(xiàn)已建立了成熟的組培快繁體系。此外，羊齒天門冬、Asparagus racemosus等近緣種組織培養(yǎng)也先后取得成功。這些天門冬屬種組織培養(yǎng)和快繁技術(shù)研究主要都是基于MS培養(yǎng)基中的不同細胞分裂素和細胞生長素等植物激素的濃度及配比。研究發(fā)現(xiàn)，天門冬屬種質(zhì)組培快繁最大障礙是生根困難，不同種激素濃度及配比差異很大，不同蘆筍品種、雄株和雌株激素濃度及配比也有區(qū)別。實踐中發(fā)現(xiàn)，興安天門冬組培苗生根相當(dāng)困難，易玻璃化和產(chǎn)生愈傷。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明旨在針對現(xiàn)有技術(shù)缺陷，提供一種針對興安天門冬的組培快繁方法，以解決現(xiàn)有技術(shù)中在組織培養(yǎng)條件下興安天門冬生長情況較差的技術(shù)問題。

本發(fā)明要解決的另一技術(shù)問題是現(xiàn)有技術(shù)中組織培養(yǎng)條件下興安天門冬生根困難。

本發(fā)明要解決的再一技術(shù)問題是現(xiàn)有技術(shù)中組織培養(yǎng)條件下興安天門冬繁殖系數(shù)和移栽成活率較低。

為實現(xiàn)以上技術(shù)目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

一種針對興安天門冬的組培快繁方法，包括以下步驟：

1)取興安天門冬嫩莖作為外植體，清洗消毒，切成每個帶有1～2腋芽的莖段；

2)腋芽誘導(dǎo)培養(yǎng)；

3)根叢誘導(dǎo)培養(yǎng)：取步驟2)培養(yǎng)后的莖段，取其上長出的、超過5cm的莖，切去莖尖，平鋪接種于根叢誘導(dǎo)培養(yǎng)S2上，無菌培養(yǎng)20～30天，而后切除此期間長出的新生莖的莖尖，重新平鋪接種于新的根叢誘導(dǎo)培養(yǎng)S2上，繼代培養(yǎng)1～2周期，直至每個葉腋處長出3～8個成簇的嫩莖，得到母體莖段，每個成簇的嫩莖群基部即為根叢；

4)根叢增殖培養(yǎng)：取步驟3)所得的母體莖段，分割出若干株高為2～3cm的根叢，接種到增殖培養(yǎng)基SA上，無菌培養(yǎng)20～30天，取出根叢，分割成2～4個小根叢，接種于新的增殖培養(yǎng)基SA上，繼代培養(yǎng)1～2周期；

5)生根預(yù)分化培養(yǎng)：取步驟4)培養(yǎng)后的小根叢，修剪至株高2～3cm，接種至生根預(yù)分化培養(yǎng)基RM5-1中，無菌培養(yǎng)20～30天，而后繼代培養(yǎng)1～2周期；

6)生根培養(yǎng)：取步驟5)預(yù)分化培養(yǎng)后的小根叢，分割成若干株高為2～3cm的、每個帶3～5個莖的子根叢，接種于生根培養(yǎng)基RM5-2中，無菌培養(yǎng)20～30天，繼代培養(yǎng)1～2周期，直至60％以上子根叢基部長出3～5條肉質(zhì)根；