[發(fā)明專利]一種針對興安天門冬的組培快繁方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710141841.8
• 申請日: 2017-03-10
• 公開（公告）號: CN106942053B
• 公開（公告）日: 2019-04-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周勁松;陳光宇;湯泳萍;羅紹春;張?jiān)榔?/a>;謝啟鑫;尹玉玲
• 申請（專利權(quán)）人: 江西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 南昌新天下專利商標(biāo)代理有限公司 36115
• 代理人: 劉華

1.一種針對興安天門冬的組培快繁方法，其特征在于包括以下步驟：

1)取興安天門冬嫩莖作為外植體，清洗消毒，切成每個帶有1～2個腋芽的莖段；

2)腋芽誘導(dǎo)培養(yǎng)；用于腋芽誘導(dǎo)培養(yǎng)的腋芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基，其成分為：MS培養(yǎng)基，L-谷氨酰胺0.2g/L，6-BA0.2mg/L，激動素0.2mg/L，萘乙酸0.2mg/L，嘧啶醇0.1mg/L，3％蔗糖，瓊脂0.8％；所述腋芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的pH為5.8；

3)根叢誘導(dǎo)培養(yǎng)：取步驟2)培養(yǎng)后的莖段，取其上長出的、超過5cm的莖，切去莖尖，平鋪接種于根叢誘導(dǎo)培養(yǎng)基S2上，無菌培養(yǎng)20～30天，而后切除此期間長出的新生莖的莖尖，重新平鋪接種于新的根叢誘導(dǎo)培養(yǎng)基S2上，繼代培養(yǎng)1～2周期，直至每個葉腋處長出3～8個成簇的嫩莖，得到母體莖段，每個成簇的嫩莖群基部是后續(xù)誘導(dǎo)生根部位，即為根叢；

4)根叢增殖培養(yǎng)：取步驟3)所得的母體莖段，分割出若干株高為2～3cm的根叢，接種到根叢增殖培養(yǎng)基SA上，無菌培養(yǎng)20～30天，取出根叢，分割成2～4個小根叢，接種于新的根叢增殖培養(yǎng)基SA上，繼代培養(yǎng)1～2周期；

5)生根預(yù)分化培養(yǎng)：取步驟4)培養(yǎng)后的小根叢，修剪至株高2～3cm，接種至生根預(yù)分化培養(yǎng)基RM5-1中，無菌培養(yǎng)20～30天，而后繼代培養(yǎng)1～2周期；

6)生根培養(yǎng)：取步驟5)預(yù)分化培養(yǎng)后的小根叢，分割成若干株高為2～3cm的、每個帶3～5個莖的子根叢，接種于生根培養(yǎng)基RM5-2中，無菌培養(yǎng)20～30天，繼代培養(yǎng)1～2周期，直至60％以上子根叢基部長出3～5條肉質(zhì)根；

其中，所述根叢誘導(dǎo)培養(yǎng)基S2的成分為：MS培養(yǎng)基，L-谷氨酰胺0.2g/L，6-BA 0.1mg/L，激動素0.2mg/L，萘乙酸0.2mg/L，嘧啶醇0.1mg/L，蔗糖3％，瓊脂0.8％；所述根叢誘導(dǎo)培養(yǎng)基S2的pH為5.8；

所述根叢增殖培養(yǎng)基SA的成分為：MS培養(yǎng)基，L-谷氨酰胺0.2g/L，激動素0.2mg/L，萘乙酸0.2mg/L，嘧啶醇0.2mg/L，蔗糖3％，瓊脂0.8％；所述根叢增殖培養(yǎng)基SA的pH為5.8；

所述生根預(yù)分化培養(yǎng)基RM5-1的成分為：MS培養(yǎng)基，L-谷氨酰胺0.2g/L，萘乙酸0.2mg/L，嘧啶醇1mg/L，蔗糖3％，瓊脂0.8％；所述生根預(yù)分化培養(yǎng)基RM5-1的pH為5.8；

所述生根培養(yǎng)基RM5-2的成分為：MS培養(yǎng)基，L-谷氨酰胺0.2g/L，萘乙酸0.2mg/L，嘧啶醇1.3mg/L，蔗糖6％，瓊脂0.8％；所述生根培養(yǎng)基RM5-2的pH為5.8。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種針對興安天門冬的組培快繁方法，其特征在于步驟1)具體包括以下操作：取長度為10～20cm的興安天門冬嫩莖作為外植體，流動水沖洗10min后，在無菌條件下切成3～4段，置于60～90％v/v濃度的酒精溶液中浸泡20～40秒，然后在有效氯為0.1～0.3％的次氯酸鈉溶液中浸泡6～10分鐘，無菌水沖洗3～4次，無菌濾紙吸干。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種針對興安天門冬的組培快繁方法，其特征在于步驟5)繼代培養(yǎng)后部分根叢基部分化誘導(dǎo)長出1～2條肉質(zhì)根。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種針對興安天門冬的組培快繁方法，其特征在于步驟6)所得產(chǎn)物每株上具有4～6根嫩莖和3～4條肉質(zhì)貯藏根，所述貯藏根的根長為3～4cm。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種針對興安天門冬的組培快繁方法，其特征在于還包括以下步驟7)：在春季4～5月份或秋季9～10月份擇時將步驟6)培養(yǎng)得到的組培苗開瓶，煉苗5～7天，洗凈根部，修剪莖頂，移栽至大棚內(nèi)泥炭土基質(zhì)中，用遮光率為50～75％的遮陽網(wǎng)覆蓋大棚進(jìn)行遮光保濕處理7～10天，隨后常規(guī)育苗管理20～30天，獲得移栽成活的興安天門冬幼苗植株。

6.根據(jù)權(quán)利要求1～4任一項(xiàng)所述的一種針對興安天門冬的組培快繁方法，其特征在于所述無菌培養(yǎng)的條件均為：溫度26～28℃，相對濕度70～80％，光照時間為12h/d，光照強(qiáng)度2500Lux。