[發(fā)明專利]提高羊口瘡疫苗免疫原性的佐劑及其制備方法和應(yīng)用在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201710138800.3 | 申請(qǐng)日： | 2017-03-09 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN107050450A | 公開（公告）日： | 2017-08-18 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 鮮思美;李鵬飛;馮將;劉嬡;李婷;張益;包細(xì)明;張素輝;許國(guó)洋 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 貴州大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | A61K39/39 | 分類號(hào)： | A61K39/39;A61K39/275;C12N15/79;C12N15/12;C12N15/66;A61P37/04;A61P31/20;A61P1/02 |
| 代理公司： | 北京元本知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所11308 | 代理人： | 黎昌莉 |
| 地址： | 55002*** | 國(guó)省代碼： | 貴州;52 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 提高 口瘡 疫苗 免疫原性 佐劑 及其 制備 方法 應(yīng)用 | ||
1.提高羊口瘡疫苗免疫原性的佐劑，其特征在于，所述佐劑包括真核表達(dá)質(zhì)粒pVAX1-IL-2。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的佐劑，其特征在于，所述真核表達(dá)質(zhì)粒pVAX1-IL-2中含有山羊IL-2的全基因編碼序列，如SEQ ID NO:1所示。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的佐劑，其特征在于，所述真核表達(dá)質(zhì)粒pVAX1-IL-2的OD260-280數(shù)值為1.8-2.0。
4.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的佐劑的制備方法，其特征在于，將IL-2基因構(gòu)建到真核表達(dá)載體pVAX1中，得基因真核表達(dá)質(zhì)粒pVAX1-IL-2。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
1)提取山羊淋巴細(xì)胞中RNA，進(jìn)行PCR目的基因IL-2的擴(kuò)增；
2)將得到的IL-2基因與pMD19-T載體進(jìn)行連接，再經(jīng)轉(zhuǎn)化得重組質(zhì)粒；
3)采用HindⅢ和EcoRⅠ對(duì)pVAX1載體和重組質(zhì)粒進(jìn)行雙酶切，得IL-2基因目的片段和pVAX1載體片段；
4)將得到的IL-2基因目的片段和pVAX1載體片段進(jìn)行連接和轉(zhuǎn)化，再經(jīng)鑒定和提取，得基因真核表達(dá)質(zhì)粒pVAX1-IL-2。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于，步驟1)中的擴(kuò)增引物如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的佐劑，其特征在于，所述佐劑還包括藥學(xué)上可接受的載體或助劑。
8.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述佐劑的應(yīng)用，其特征在于，所述佐劑與羊口瘡疫苗聯(lián)合應(yīng)用，所述佐劑能提高羊口瘡疫苗的免疫原性。
9.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的佐劑在制備預(yù)防或治療羊口瘡的藥物中的應(yīng)用。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物包括所述佐劑，羊口瘡疫苗和藥學(xué)上可接受的載體或助劑。
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