[發(fā)明專利]一種超氧化物歧化酶Cu,Zn-SOD基因及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710136463.4
• 申請(qǐng)日: 2017-03-09
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN106834312B
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-04-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉金鋒;劉哲;李杰;姜曰水;魏貝貝;鞏志金;車程川;楊革
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 曲阜師范大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N15/53
• 分類號(hào): C12N15/53;C12N9/02;C12N15/10;C12N15/70
• 代理公司: 濟(jì)南泉城專利商標(biāo)事務(wù)所 37218
• 代理人: 劉麗

1.一種超氧化物歧化酶Cu,Zn-SOD基因，其特征在于核苷酸序列如序列表中序列1所示。

2.一種含有權(quán)利要求1中所述的超氧化物歧化酶Cu,Zn-SOD基因的載體的構(gòu)建方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）涉及引物，核苷酸序列如下：

擴(kuò)增引物為：上游引物P1:5’- ATAGGATCCATGGCGATGAAAGCGGTGT-3’，

下游引物P2:5’- GCAGTCGACTTACTGCGCAATCCCAATCACT-3’，

單點(diǎn)突變引物：上游引物P3:5’-GGGTTCCACGTCCATTGGTATGGGGACAATAC-3’，

下游引物P4:5’-GTATTGTCCCCATACCAATGGACGTGGAACCC- 3’，

雙點(diǎn)突變引物：上游引物P5:5’-GTGACTGCTATAAAGGACGGTG- 3’，

下游引物P6: 5’-CACCGTCCTTTATAGCAGTCAC- 3’，

（2）由小鼠血液中提取RNA，反轉(zhuǎn)為cDNA并經(jīng)上下游引物P1、P2進(jìn)行PCR得到目的基因序列，然后以目的基因?yàn)槟０澹詥吸c(diǎn)突變引物P3、P4及雙點(diǎn)突變引物P5、P6為引物，通過(guò)巢式PCR擴(kuò)增以得到所需突變基因，切膠回收所需目的片段，酶切轉(zhuǎn)入表達(dá)載體。

3.一種權(quán)利要求1所述的超氧化物歧化酶Cu,Zn-SOD基因在制備氧自由基清除劑中的應(yīng)用。