[發明專利]一種超氧化物歧化酶Cu,Zn-SOD基因及其應用有效
| 申請號： | 201710136463.4 | 申請日： | 2017-03-09 |
| 公開（公告）號： | CN106834312B | 公開（公告）日： | 2020-04-17 |
| 發明（設計）人： | 劉金鋒;劉哲;李杰;姜曰水;魏貝貝;鞏志金;車程川;楊革 | 申請（專利權）人： | 曲阜師范大學 |
| 主分類號： | C12N15/53 | 分類號： | C12N15/53;C12N9/02;C12N15/10;C12N15/70 |
| 代理公司： | 濟南泉城專利商標事務所 37218 | 代理人： | 劉麗 |
| 地址： | 273165 *** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 超氧化物歧化酶 cu zn sod 基因 及其 應用 | ||
1.一種超氧化物歧化酶Cu,Zn-SOD基因，其特征在于核苷酸序列如序列表中序列1所示。
2.一種含有權利要求1中所述的超氧化物歧化酶Cu,Zn-SOD基因的載體的構建方法，其特征在于包括以下步驟：
（1）涉及引物，核苷酸序列如下：
擴增引物為：上游引物P1:5’- ATAGGATCCATGGCGATGAAAGCGGTGT-3’，
下游引物P2:5’- GCAGTCGACTTACTGCGCAATCCCAATCACT-3’，
單點突變引物：上游引物P3:5’-GGGTTCCACGTCCATTGGTATGGGGACAATAC-3’，
下游引物P4:5’-GTATTGTCCCCATACCAATGGACGTGGAACCC- 3’，
雙點突變引物：上游引物P5:5’-GTGACTGCTATAAAGGACGGTG- 3’，
下游引物P6: 5’-CACCGTCCTTTATAGCAGTCAC- 3’，
（2）由小鼠血液中提取RNA，反轉為cDNA并經上下游引物P1、P2進行PCR得到目的基因序列，然后以目的基因為模板，以單點突變引物P3、P4及雙點突變引物P5、P6為引物，通過巢式PCR擴增以得到所需突變基因，切膠回收所需目的片段，酶切轉入表達載體。
3.一種權利要求1所述的超氧化物歧化酶Cu,Zn-SOD基因在制備氧自由基清除劑中的應用。
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