[發(fā)明專利]一種同時(shí)檢測(cè)新會(huì)陳皮中真菌毒素和農(nóng)藥殘留的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710133811.2
• 申請(qǐng)日: 2017-03-08
• 公開（公告）號(hào): CN106950298B
• 公開（公告）日: 2020-07-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 彭曉俊;蔡璇;梁偉華;伍長(zhǎng)春
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 彭曉俊
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02
• 代理公司: 廣州新諾專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 44100
• 代理人: 華輝

一種同時(shí)檢測(cè)新會(huì)陳皮中真菌毒素和農(nóng)藥殘留的方法，所述方法包括：制備陳皮基質(zhì)空白提取液；制作陳皮基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線；樣品處理：用提取液對(duì)樣品進(jìn)行提取，然后加入改性多壁碳納米管進(jìn)行凈化處理并進(jìn)行過(guò)濾得到樣品凈化液；樣品檢測(cè)：對(duì)樣品凈化液進(jìn)行液相色譜?串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定。本發(fā)明以改性多壁碳納米管作為凈化吸附劑，將改良QuEChERS法與液相色譜?串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀結(jié)合應(yīng)用于新會(huì)陳皮中真菌毒素和農(nóng)藥殘留的同時(shí)檢測(cè)，操作簡(jiǎn)單，準(zhǔn)確度高，穩(wěn)定性好，滿足痕量分析的要求。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及真菌毒素和農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)方法，特別是涉及一種同時(shí)檢測(cè)新會(huì)陳皮中真菌毒素和農(nóng)藥殘留的方法。

背景技術(shù)

陳皮為蕓香科植物橘及其栽培變種的干燥成熟果皮，新會(huì)是陳皮的道地產(chǎn)區(qū)，新會(huì)陳皮為廣東十大地道中藥材之一，而經(jīng)年陳藏的新會(huì)陳皮更是珍品。2016年新會(huì)陳皮種植面積共6.5萬(wàn)畝，陳皮總產(chǎn)量預(yù)計(jì)達(dá)7000噸，行業(yè)產(chǎn)值近30億元，但新會(huì)陳皮面臨的食品安全風(fēng)險(xiǎn)十分嚴(yán)峻。陳皮在加工儲(chǔ)存過(guò)程中，由于受溫度、濕度等影響，容易霉變而產(chǎn)生真菌，真菌代謝產(chǎn)生有毒的真菌毒素，真菌毒素能損壞人的肝腎功能、致癌、致畸并誘發(fā)免疫抑制性疾病。在這些代謝物中，黃曲霉毒素類、赭曲霉毒素類、玉米赤霉烯酮對(duì)人體健康危害尤為巨大。此外，農(nóng)作物種植過(guò)程中引入的農(nóng)藥殘留，通過(guò)食物鏈進(jìn)入人體，進(jìn)而危害人體健康，同樣是導(dǎo)致食品安全突發(fā)事件頻發(fā)的主要原因。2,4-二氯苯氧乙酸是應(yīng)用最為廣泛的除草劑，滅多威是一種廣譜性氨基甲酸酯類殺蟲劑，毒死蜱則是最常用的殺蟲劑，這3種農(nóng)藥高效、廣譜，具有擊倒速度快、作用范圍廣等特點(diǎn)，在我國(guó)農(nóng)作物種植中使用廣泛。因此，由真菌毒素、農(nóng)藥殘留產(chǎn)生的食品健康風(fēng)險(xiǎn)問(wèn)題日益受到人們的關(guān)注。

目前，真菌毒素檢測(cè)方法主要有酶聯(lián)免疫法(ELISA)、薄層色譜法、液相色譜法和液質(zhì)聯(lián)用法等，但前三個(gè)方法選擇性較差，只能檢測(cè)單一類的真菌毒素，不能同時(shí)檢測(cè)多種真菌毒素。而農(nóng)藥定量檢測(cè)一般采用氣相色譜法、氣質(zhì)聯(lián)用法。現(xiàn)有真菌毒素、農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法相對(duì)較為獨(dú)立，真菌毒素和農(nóng)藥殘留不能同時(shí)檢測(cè)，無(wú)法滿足食品安全突發(fā)事件快速處置要求的檢測(cè)時(shí)間短、檢測(cè)目標(biāo)組分多。近年來(lái)，液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)(HPLC-MS/MS)在檢測(cè)方面的優(yōu)勢(shì)逐漸顯現(xiàn)，采用選擇離子監(jiān)測(cè)技術(shù)，可大大提高檢測(cè)的靈敏度和準(zhǔn)確性，被越來(lái)越多地應(yīng)用于高通量分析，但常規(guī)前處理方法步驟繁瑣、有機(jī)試劑消耗量大，對(duì)操作人員技能要求高。而且由于新會(huì)陳皮特有的揮發(fā)油、黃酮化合物、有機(jī)酸等化學(xué)成分，加之還有大量色素、脂肪、糖等生化成分，用傳統(tǒng)的液液萃取、索氏抽提、固相萃取等前處理方法，普遍存在基質(zhì)干擾嚴(yán)重、步驟繁瑣、重現(xiàn)性差且有機(jī)溶劑消耗量大等缺點(diǎn)。

2003年，Anastassiades等人建立了QuEChERS(Quick、Easy、Cheap、Effective、Rugged、Safe)新型樣品前處理方法，其步驟可以簡(jiǎn)單歸納為：(1)樣品粉碎；(2)單一溶劑乙腈提取；(3)加入MgSO₄等鹽類除水；(4)加入乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)等凈化吸附劑凈化；(5)對(duì)提取的上清液進(jìn)行GC-MS、LC-MS檢測(cè)。QuEChERS方法因操作簡(jiǎn)單、通用性強(qiáng)、成本低、環(huán)境友好、能滿足性質(zhì)差異較大的多種目標(biāo)物的同時(shí)分析檢測(cè)，被國(guó)內(nèi)外廣泛應(yīng)用于農(nóng)藥殘留檢測(cè)，但是，用乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)作為凈化吸附劑，去除基質(zhì)中干擾物的能力有限。

而多壁碳納米管(MWNTs)因其準(zhǔn)一維中空管結(jié)構(gòu)加之大的比表面積，使其在凈化吸附方面具有優(yōu)異的性能。目前有文獻(xiàn)報(bào)道其用于痕量組分樣品前處理中的富集與凈化。但未處理的多壁碳納米管由于表面缺少活性官能基團(tuán)，疏水性強(qiáng)，不溶不熔，會(huì)團(tuán)聚成致密的網(wǎng)絡(luò)，影響了其作為凈化吸附劑的應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容

基于此，本發(fā)明的目的在于，提供一種同時(shí)檢測(cè)新會(huì)陳皮中真菌毒素和農(nóng)藥殘留的方法，該方法以改性多壁碳納米管作為凈化吸附劑，將改良QuEChERS法與液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)結(jié)合應(yīng)用于新會(huì)陳皮中真菌毒素和農(nóng)藥殘留的檢測(cè)，能有效除去基質(zhì)干擾，方法準(zhǔn)確、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單快速。

本發(fā)明的技術(shù)方案如下：