[發明專利]n?3PUFA磷脂在改善慢性疲勞綜合征制品中的應用

在審

• 申請號: 201710130672.8
• 申請日: 2017-03-07
• 公開（公告）號: CN106880049A
• 公開（公告）日: 2017-06-23
• 發明（設計）人: 王玉明;王丹;徐杰;薛勇;薛長湖;李兆杰;王靜鳳;常耀光;唐慶娟
• 申請（專利權）人: 中國海洋大學
• 主分類號: A23L33/115
• 分類號: A23L33/115;A61K31/685;C07F9/10;A61P39/00
• 代理公司: 青島海昊知識產權事務所有限公司37201
• 代理人: 孫洪葉

1.n-3PUFA磷脂在改善慢性疲勞綜合征制品中的應用。

2.如權利要求1所述的應用，其特征在于，所述的n-3PUFA磷脂包括EPA磷脂和DHA磷脂。

3.如權利要求2所述的應用，其特征在于，所述EPA磷脂為EPA磷脂酰膽堿、EPA磷脂酰乙醇胺、EPA磷脂酰絲氨酸、EPA磷脂酰肌醇的一種或多種混合。

4.如權利要求2所述的應用，其特征在于，所述DHA磷脂為DHA磷脂酰膽堿、DHA磷脂酰乙醇胺、DHA磷脂酰絲氨酸和DHA磷脂酰肌醇中的一種或多種混合。

5.如權利要求2所述的應用，其特征在于，所述EPA磷脂的制備方法包括以下步驟：

1）海參經真空冷凍干燥粉碎后，制成粉末；

2）取海參干粉，在氯仿和甲醇的混合溶液中抽提過夜，過濾后，用氯化鉀溶液抽提，靜置分層，收集氯仿層，經減壓濃縮得到海參脂質粗提取物；

3）將硅膠經活化裝柱后，用氯仿平衡硅膠柱 ；再將步驟 2）得到的海參脂質粗提物用氯仿溶解后，緩慢倒入硅膠柱中，依次用氯仿、氯仿-甲醇混合液、丙酮和甲醇進行洗脫，收集洗脫液，洗脫液進行薄層硅膠板層析，并用碘和Dittmer試劑顯色確認后減壓濃縮去除殘留有機溶劑即得到海參磷脂；

其中，收集氯仿-甲醇的洗脫液為EPA磷脂酰乙醇胺，收集甲醇的洗脫液為EPA磷脂酰膽堿；

4）將醋酸/醋酸鈉溶液緩沖液放入集熱式恒溫加熱磁力攪拌器中預熱，將 L-絲氨酸溶于其中，加入上述步驟3）中的EPA磷脂酰膽堿，最后加入PLD，在 40 ℃下攪拌反應，加入 HCl、滅活酶，反應終止，用正己烷-異丙醇提取反應產物，即得到EPA磷脂酰絲氨酸；

5）將步驟 2）中海參脂質粗提取物，加入丙酮、三甲胺和乙酸酐，冷卻過濾后，用丙酮洗脫，得到EPA磷脂酰肌醇。

6.如權利要求2所述的應用，其特征在于，所述DHA磷脂的制備方法包括以下步驟：

1）魷魚卵經真空冷凍干燥粉碎后，制成粉末；

2）取魷魚卵干粉，在氯仿和甲醇混合溶液中抽提過夜，過濾后，用氯化鉀溶液抽提，靜置分層，收集氯仿層，經減壓濃縮得到魷魚卵脂質粗提取物；

3）將硅膠經活化裝柱后，用氯仿平衡硅膠柱 ；再將步驟 2）得到的魷魚卵的脂質粗提物用氯仿溶解后，緩慢倒入硅膠柱中，依次用氯仿、氯仿-甲醇混合液、丙酮和甲醇進行洗脫，收集洗脫液，洗脫液進行薄層硅膠板層析，并用碘和Dittmer試劑顯色確認后減壓濃縮去除殘留有機溶劑即得到魷魚卵磷脂；

其中，收集氯仿-甲醇的洗脫液為DHA磷脂酰乙醇胺，收集甲醇的洗脫液為DHA磷脂酰膽堿；

4）將醋酸/醋酸鈉溶液緩沖液放入集熱式恒溫加熱磁力攪拌器中預熱，將 L-絲氨酸溶于其中，加入上述步驟3）中的DHA磷脂酰膽堿，最后加入PLD，在 40 ℃下攪拌反應，加入 HCl，滅活酶，反應終止，用正己烷-異丙醇提取反應產物，即得到DHA磷脂酰絲氨酸；

5）將步驟 2）中魷魚卵脂質粗提取物，加入丙酮、三甲胺和乙酸酐，冷卻過濾后，用丙酮洗脫，得到DHA磷脂酰肌醇。

7.如權利要求2所述的應用，其特征在于，所述的改善慢性疲勞綜合征制品為食品、飼料或藥品；其中，所述EPA或DHA磷脂的總添加質量分數在0.5%-2%。