[發(fā)明專(zhuān)利]產(chǎn)腈水解酶的酵母菌株選育及其在腈類(lèi)化合物生物轉(zhuǎn)化中的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710127903.X
• 申請(qǐng)日: 2017-03-06
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107022497B
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-09-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 許正宏;史勁松;張強(qiáng);龔勁松;李恒;竇文芳
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 江南大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C12N1/16
• 分類(lèi)號(hào): C12N1/16;C12N1/02;C12P7/42;C12R1/645
• 代理公司: 蘇州市中南偉業(yè)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 32257
• 代理人: 楊慧林

1.一株產(chǎn)腈水解酶的酵母菌株，該菌株屬于季也蒙畢赤酵母(Meyerozymaguilliermondii)3H2-2，現(xiàn)保藏在位于北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)的中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏編號(hào)為CGMCC No.12935，保藏日期為2016年9月5日。

2.權(quán)利要求1所述的季也蒙畢赤酵母(Meyerozyma guilliermondii)3H2-2的培養(yǎng)方法，其特征在于，該菌株發(fā)酵產(chǎn)酶培養(yǎng)基中含有3-羥基丙腈0.5-4g/L，其他組分包含但不限于以下組分，按質(zhì)量體積比為：酵母粉5-15g/L，蛋白胨5-20g/L，NaCl 0.5-4g/L，KH₂PO₄ 1-5g/L，K₂HPO₄ 1-5g/L，甘油5-15g/L，其培養(yǎng)基pH 5.0-8.0，培養(yǎng)條件為在轉(zhuǎn)速為100-250r/min的搖床中于25-40℃培養(yǎng)20-60h。

3.季也蒙畢赤酵母(Meyerozyma guilliermondii)3H2-2轉(zhuǎn)化3-羥基丙腈生成3-羥基丙酸的方法，其特征在于：

(1)季也蒙畢赤酵母(Meyerozyma guilliermondii)3H2-2菌體收集：根據(jù)權(quán)利要求2所述的產(chǎn)酶培養(yǎng)方法進(jìn)行季也蒙畢赤酵母(Meyerozyma guilliermondii)3H2-2的發(fā)酵培養(yǎng)，發(fā)酵結(jié)束后，在8000-15000rpm條件下離心2～10min，收集經(jīng)培養(yǎng)獲得的菌體，用0.01-0.5M，pH6.0-8.0的磷酸鹽緩沖液洗滌菌體2～4次；

(2)生物轉(zhuǎn)化：將季也蒙畢赤酵母(Meyerozyma guilliermondii)3H2-2菌體重懸于緩沖液中，并與3-羥基丙腈溶液混勻，添加0.5％-10％終濃度的葡萄糖，反應(yīng)溫度保持在20-60℃，攪拌轉(zhuǎn)速保持在50-250r/min，反應(yīng)時(shí)間10～150h。