[發明專利]一種苯乙烯中毒遺傳易感性無創檢測試劑盒

在審

• 申請號: 201710127819.8
• 申請日: 2017-03-06
• 公開（公告）號: CN107022606A
• 公開（公告）日: 2017-08-08
• 發明（設計）人: 張放;邵華;薄存香
• 申請（專利權）人: 山東省職業衛生與職業病防治研究院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 北京一格知識產權代理事務所(普通合伙)11316
• 代理人: 滑春生,趙永偉

1.一種苯乙烯中毒遺傳易感性無創檢測試劑盒，其特征在于，所述苯乙烯中毒遺傳易感性無創檢測試劑盒包括：檢測CYP2E1基因上5^，端上游調節區RsaI rs2031920、EPHX1基因上T/C rs1051740及A/G rs2234922的3個單核苷酸多態性位點基因型的特異性引物對、2×PCR Mix、PCR反應緩沖液、FastDigest-RsaI核酸內切酶、FastDigest-EcoRV核酸內切酶、ddH₂O。

2.如權利要求1所述的苯乙烯中毒遺傳易感性無創檢測試劑盒，其特征在于，所述的特異性引物對是指針對CYP2E1基因上5^，端上游調節區RsaI rs2031920、EPHX1基因上T/C rs1051740及A/G rs2234922的3個單核苷酸多態性位點，通過PCR反應特異性擴增出包含這3個SNPs位點DNA片段的引物對。

3.如權利要求1所述的苯乙烯中毒遺傳易感性無創檢測試劑盒，其特征在于，所述的PCR產物酶切組件是針對CYP2E1基因上5^，端上游調節區RsaI rs2031920、EPHX1基因上T/C rs1051740及A/G rs2234922的3個單核苷酸多態性位點而配置，通過PCR-RFLP技術特異性地檢測出上述3個SNPs位點的基因型。

4.如權利要求1所述的苯乙烯中毒遺傳易感性無創檢測試劑盒，其特征在于，所含的3對特異性引物序列如下：

CYP2E序列SEQ ID NO：1

正向引物序列：5′-TTCATT GTGTCTTCTAACTGG-3′

反向引物序列：5′-CCAGTCGAGTCTTACATTGTCA-3′

EPHX1 序列SEQ ID NO：2

正向引物序列：5′-GATCGATAAGTTCCGTTTCACC-3′

反向引物序列：5′-AATCTTAGTCTTGAAGTGAGGGT-3′

EPHX1 序列 SEQ ID NO：3

正向引物序列：5′-ACATCCACTTCATCCACG-3′

反向引物序列：5′-ATGCCTCTGAGAAGCCAT-3′。

5.如權利要求1所述的苯乙烯中毒遺傳易感性無創檢測試劑盒，其特征在于，試劑盒的組分和含量包括：

PCR反應體系，反應體系為總體積25μl，內含正、反向引物濃度20μM各0.25μl、2×PCR Mix12.5μl，DNA模板1μl，ddH₂O15μl；

PCR產物酶切體系：反應體系為總體積30μl，其中PCR擴增產物為15μl、FastDigest-RsaI核酸內切酶、FastDigest-EcoRV核酸內切酶各1.5μl，10×Buffer3μl，ddH₂O9μl。

6.如權利要求1所述的苯乙烯中毒遺傳易感性無創檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒的保存溫度為-20℃。