[發明專利]ATP核酸適配體、利用納米金顯色檢測ATP的方法及試劑盒有效
| 申請號： | 201710124724.0 | 申請日： | 2017-03-03 |
| 公開（公告）號： | CN106967721B | 公開（公告）日： | 2020-12-04 |
| 發明（設計）人： | 張晶珠;樊婷婷;毛瑜;李露露 | 申請（專利權）人： | 深圳市坤健創新藥物研究院 |
| 主分類號： | C12N15/115 | 分類號： | C12N15/115;G01N21/33 |
| 代理公司： | 北京思創大成知識產權代理有限公司 11614 | 代理人： | 張清芳 |
| 地址： | 518063 廣東省深圳市龍華新區觀瀾大*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | atp 核酸 適配體 利用 納米 顯色 檢測 方法 試劑盒 | ||
1.一種利用納米金顯色檢測ATP的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：
（1）使含有ATP的待測溶液與含有ATP核酸適配體的檢測溶液混合；所述ATP核酸適配體的堿基序列如SEQ ID NO：1所示：5’-ACCTTCCTGGGGGAGTATTGCGGAGGAAGGT-3’（SEQ ID NO：1）；
（2）將步驟（1）得到的混合液與納米金溶液混合，然后加入鹽溶液并混勻；
（3）儀器檢測或觀測步驟（2）得到的混合溶液；
步驟（1）中，含有ATP的待測溶液中的ATP與含有ATP核酸適配體的檢測溶液中的ATP核酸適配體的摩爾比為1：1-1000；
步驟（1）中，含有ATP核酸適配體的檢測溶液中ATP核酸適配體的濃度為0.1μM-10μM；
步驟（1）中，含有ATP核酸適配體的檢測溶液為Tris-HCl緩沖液；
步驟（2）中，步驟（1）得到的混合液中的ATP核酸適配體與納米金溶液中的納米金顆粒的摩爾比為1：0.001-0.01；
步驟（2）中，所述鹽溶液的加入量使得步驟（2）得到的混合溶液中鹽的終濃度為10-100mM。
2.根據權利要求1所述的方法，其中，步驟（2）中，所述鹽溶液為無機鹽溶液。
3.根據權利要求2所述的方法，其中，步驟（2）中，所述鹽溶液為氯化鈉溶液。
4.根據權利要求1所述的方法，其中，所述納米金溶液中納米金顆粒的粒徑為10-20nm。
5.一種利用納米金顯色檢測ATP的試劑盒，其特征在于，該試劑盒包括以下組成：
1）含有如權利要求1所述的ATP核酸適配體的檢測溶液；
2）鹽溶液；
3）納米金溶液；
含有ATP核酸適配體的檢測溶液中ATP核酸適配體的濃度為0.1μM-10μM；
含有ATP核酸適配體的檢測溶液為Tris-HCl緩沖液；
所述鹽溶液的濃度為1-2M。
6.根據權利要求5所述的試劑盒，其中，所述鹽溶液為氯化無機鹽溶液。
7.根據權利要求6所述的試劑盒，其中，所述鹽溶液為氯化鈉溶液。
8.根據權利要求5所述的試劑盒，其中，所述納米金溶液中納米金顆粒的粒徑為10-20nm。
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