[發明專利]一種用于檢測口蹄疫的環介導等溫擴增引物組及試劑盒

在審

• 申請號: 201710124594.0
• 申請日: 2017-03-03
• 公開（公告）號: CN106636476A
• 公開（公告）日: 2017-05-10
• 發明（設計）人: 張薇;王耕;王振超;陳安東
• 申請（專利權）人: 張薇
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 北京細軟智谷知識產權代理有限責任公司11471
• 代理人: 王金寶

1.一種用于檢測口蹄疫的環介導等溫擴增引物組，其特征在于，包括內引物1、內引物2、外引物1、外引物2、環引物1和環引物2，所述內引物1的序列如SEQ ID NO：1所示，所述內引物2的序列如SEQ ID NO：2所示，所述外引物1的序列如SEQ ID NO：3所示，所述外引物2的序列如SEQ ID NO：4所示，所述環引物1的序列如SEQ ID NO：5所示，所述環引物2的序列如SEQ ID NO：6所示。

2.一種含有權利要求1所述環介導等溫擴增引物組的試劑盒，其特征在于，還包括反應液，所述反應液包括反應濃縮液和逆轉錄酶；所述反應濃縮液包括DNA聚合酶，酶緩沖液，dNTP，MgSO₄，甘氨酸三甲胺內鹽和熒光染料。

3.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于，還包括對照物，所述對照物包括陽性對照物和陰性對照物。

4.根據權利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述陽性對照物為含目的基因的大腸桿菌質粒DNA片段，所述目的基因的序列如SEQ ID NO：7所示，所述陰性對照物為不含目的基因的反應液或雙蒸水。

5.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述內引物1和內引物2的濃度為40nM，所述外引物1和外引物2的濃度為5nM，所述環引物1和環引物2的濃度為20nM。

6.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述環介導等溫擴增引物組的體積為6ul，所述反應濃縮液的體積為15ul，逆轉錄酶的體積為1ul。

7.根據權利要求6所述的試劑盒，其特征在于，所述環介導等溫擴增引物組中各引物的體積均為1ul。