[發明專利]液固雙相發酵生產厚垣孢普可尼亞菌孢子的方法

在審

• 申請號: 201710121569.7
• 申請日: 2017-03-02
• 公開（公告）號: CN106701655A
• 公開（公告）日: 2017-05-24
• 發明（設計）人: 豐來;譚石勇;譚武貴;羅志威;徐滔明;鄭雙鳳;張冬雪;邱堯
• 申請（專利權）人: 湖南泰谷生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12N3/00
• 分類號: C12N3/00;C12R1/645
• 代理公司: 北京紐樂康知識產權代理事務所(普通合伙)11210
• 代理人: 羅莎

1.一種液體發酵培養基，其特征在于，所述液體發酵培養基的配方為：蔗糖10-40 g/L、蛋白胨0.5-2.5 g/L、NaNO₃ 0.5-2.5 g/L、KH₂PO₄ 0.2-1.2 g/L、K₂HPO₄ 0.2-1.2 g/L、MgSO₄?7H₂O 0.25-3 g/L、FeSO₄?7H₂O 0.01-0.05 g/L、初始pH 5-8。

2.根據權利要求1所述的一種液體發酵培養基，其特征在于，所述液體發酵培養基的配方為：蔗糖15-30 g/L、蛋白胨1-2 g/L、NaNO₃ 1-2 g/L、KH₂PO₄ 0.25-0.8 g/L、K₂HPO₄ 0.25-0.8 g/L、MgSO₄?7H₂O 0.5-2.5 g/L、FeSO₄?7H₂O 0.01-0.02 g/L、初始pH 5.5-7。

3.根據權利要求1所述的一種液體發酵培養基，其特征在于，所述液體發酵培養基的配方為：蔗糖25 g/L、蛋白胨 1.5 g/L、NaNO₃ 1.5 g/L、KH₂PO₄ 0.5 g/L、K₂HPO₄ 0.5 g/L、MgSO₄?7H₂O 1 g/L、FeSO₄?7H₂O 0.01 g/L、初始pH 6。

4.一種液固雙相發酵生產厚垣孢普可尼亞菌孢子的方法，其特征在于，包括如下步驟：

a菌種活化：活化厚垣孢普可尼亞菌菌種，得到活化后的孢子懸液；

b搖瓶種子液制備：將活化后的孢子懸液按體積比8-10%的接種量接種于已滅菌的搖瓶液體發酵培養基中，進行搖瓶培養，得到搖瓶種子液；

c液體發酵：將搖瓶種子液按照體積比8-15%的接種量接種于已滅菌的發酵罐液體發酵培養基中，進行發酵培養，得到液體發酵產物；

d固體發酵產孢：將液體發酵產物按照質量比20-25%的接種量接種于已滅菌的固體發酵培養基中，進行淺盤固體發酵，得到厚垣孢普可尼亞菌孢子；

其中，所述步驟b中搖瓶液體發酵培養基和所述步驟c中發酵罐液體發酵培養基為權利要求1-3中任一項所述培養基。

5.根據權利要求4所述的一種液固雙相發酵生產厚垣孢普可尼亞菌孢子的方法，其特征在于，所述步驟d中固體發酵培養基包括如下重量份的組分：麩皮10-15份、玉米秸稈2-5份、玉米粉4-8份、營養液8-14份；其中，所述營養液中各組分的質量百分數為：蔗糖2-4%、蛋白胨0.5-2.5%、NaCl 2-4 %、NaNO₃ 0.5-1%、KH₂PO₄0.5-1%、K₂HPO₄0.5-1%、MgSO₄?7H₂O 0.5-1%、FeSO₄?7H₂O 0.2-0.4%，余量為水。

6.根據權利要求4所述的一種液固雙相發酵生產厚垣孢普可尼亞菌孢子的方法，其特征在于，所述步驟d中固體發酵培養基包括如下重量份的組分：麩皮12-15份、玉米秸稈2-3份、玉米粉5-6份、營養液9-12份；其中所述營養液中各組分的質量百分數為：蔗糖2.5-3.5%、蛋白胨1-2%、NaCl 2.5-3.5%、NaNO₃ 0.5-0.8%、KH₂PO₄0.5-0.8%、K₂HPO₄0.5-0.8%、MgSO₄?7H₂O 0.5-1%、FeSO₄?7H₂O 0.25-0.35%，余量為水。