[發(fā)明專利]微小RNA及其在制備抗日本血吸蟲感染制劑中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710118413.3
• 申請日: 2017-03-01
• 公開（公告）號: CN108531480B
• 公開（公告）日: 2022-01-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 秦志強;許靜;楊杰;呂山;李石柱;周曉農(nóng)
• 申請（專利權(quán)）人: 中國疾病預(yù)防控制中心寄生蟲病預(yù)防控制所
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/11;A61K31/713;A61K31/7088;A61P33/12;G01N33/68
• 代理公司: 上海一平知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31266
• 代理人: 王正君;馬思敏

本發(fā)明提供了微小RNA及其在制備抗日本血吸蟲感染制劑中的應(yīng)用。具體地，本發(fā)明提供了對血吸蟲有顯著殺滅或抑制作用的核酸抑制分子，尤其是微小RNA核酸分子。實驗表明，本發(fā)明的特定amiRNA對于日本血吸蟲(尤其是早期童蟲)具有很高的殺滅或抑制能力。本發(fā)明還提供了所述核酸抑制分子的制法、藥物組合物和應(yīng)用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥，具體地，涉及微小RNA及其在制備抗日本血吸蟲感染制劑中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

血吸蟲病是一種嚴(yán)重危害人類健康的寄生蟲病。目前血吸蟲病治療仍以吡喹酮為主，但完全依賴單一藥物治療難以控制血吸蟲病重復(fù)感染，且近年來研究發(fā)現(xiàn)吡喹酮化療有誘導(dǎo)抗藥性產(chǎn)生的潛在風(fēng)險，因此開展血吸蟲病新型疫苗和新藥研發(fā)對血吸蟲病有效控制乃至消除有重要的戰(zhàn)略意義。非編碼小核糖核酸廣泛存在于真核生物中，長度一般為18-30個核苷酸(nucleotide,nt)，主要包含微小核糖核酸(microRNAs,miRNA)、小干擾核糖核酸(small interfering RNA,siRNA)、Piwi-相互作用核糖核酸(piRNA)等3類，是生物基因表達、基因組穩(wěn)定和抵御外來遺傳因子的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子。近年來研究者發(fā)現(xiàn)血吸蟲不同發(fā)育階段存在其特異性非編碼RNA，這為深入研究血吸蟲發(fā)育和寄生以及致病機制提供新的思路。

微小RNA的鑒定及發(fā)現(xiàn)將有利于發(fā)現(xiàn)潛在抗日本血吸蟲藥物靶標(biāo)，為更深入了解日本血吸蟲的生物學(xué)特征以及進一步發(fā)展日本血吸蟲新藥物研發(fā)提供新線索。

因此，本領(lǐng)域迫切需要開發(fā)一種可以有效殺滅或抑制血吸蟲(尤其是日本血吸蟲,)且副作用小的微小RNA藥物。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于開發(fā)一種可以有效殺滅或抑制血吸蟲(尤其是日本血吸蟲)且副作用小的微小RNA藥物。

本發(fā)明第一方面提供了一種核酸抑制分子，所述核酸抑制分子為單鏈或雙鏈amiRNA，所述核酸抑制分子的正義鏈的5'至3'端具有式I所示的結(jié)構(gòu)：

Z₀-Z₁-Z₂ (I)

其中，

Z₀＝A、T、C、G或無；

Z₁是如SEQ ID NO.：1、3、或5所示的核苷酸序列；和

Z₂＝A、T、C、G或無。

在另一優(yōu)選例中，所述式I結(jié)構(gòu)選自下組：SEQ ID NO.：1、3、5、或其組合。

在另一優(yōu)選例中，所述的核酸抑制分子包括siRNA。

在另一優(yōu)選例中，所述的核酸抑制分子的長度為16-50nt，較佳地16-30nt，更佳地16-25nt。

在另一優(yōu)選例中，所述的核酸抑制分子為分離的、重組的、或人工合成的核酸分子。

本發(fā)明第二方面提供了一種產(chǎn)生本發(fā)明第一方面所述的核酸抑制分子的前體序列，所述前體序列正義鏈的5'至3'端具有式II所示的結(jié)構(gòu)：

式中，

B1為所需要的第一核糖核苷酸序列，其中所述的第一核糖核苷酸序列包括amiRNA序列形式；

B2為與B1基本互補或完全互補的序列，且B2與C不互補；

C為莖環(huán)結(jié)構(gòu)。

在另一優(yōu)選例中，所述的B1或所述的amiRNA具有式I結(jié)構(gòu)，或如式I所示。

在另一優(yōu)選例中，所述B1的序列選自下組：SEQ ID NO.：1、3、5、或其組合。