[發明專利]一種抗Cas9蛋白的單克隆抗體的制備及應用在審
| 申請號： | 201710110956.0 | 申請日： | 2017-02-27 |
| 公開（公告）號： | CN108503709A | 公開（公告）日： | 2018-09-07 |
| 發明（設計）人： | 馬曉飛;郭亞璐;武鵬程;陳浩;耿廣薈;康昊翔;尹長城;劉國振;吳琳;劉斯奇 | 申請（專利權）人： | 北京華大蛋白質研發中心有限公司 |
| 主分類號： | C07K16/40 | 分類號： | C07K16/40 |
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| 地址： | 101318 北京*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 編輯體系 抗體 蛋白 制備 基因 單克隆抗體 大腸桿菌表達 靶位點序列 核酸內切酶 特異性識別 基因克隆 免疫原性 遺傳改良 重組蛋白 剪切 可變區 檢測 抗原 對靶 可用 外源 位點 優選 物種 應用 | ||
1.一種單克隆抗體，其特征在于可由小鼠雜交瘤細胞系31534-12D2和31534-9B9分泌。
2.權利要求1所述的單克隆抗體，其特征在于其免疫小鼠用的抗原是將具有序列表中SEQ ID No.1的氨基酸序列經由大腸桿菌重組表達而獲得的重組Cas9蛋白片段。
3.權利要求1所述的單克隆抗體，其特征在于其重鏈和輕鏈可變區的基因編碼序列為SEQ ID 2、SEQ ID 3、SEQ ID 6、SEQ ID 7所示的DNA序列所編碼。
4.權利要求1所述的單克隆抗體，其特征在于其重鏈和輕鏈可變區氨基酸序列分別為SEQ ID 4、SEQ ID 5、SEQ ID 8、SEQ ID 9所示的氨基酸序列。
5.權利要求1所述的單克隆抗體，其特征在于其為小鼠IgG1和IgG2b亞型單克隆抗體。
6.權利要求1所述的單克隆抗體，其特征在于可識別重組Cas9蛋白和轉基因植物(水稻、玉米、小麥、擬南芥、煙草)，動物，細胞，微生物。
7.權利要求1所述的單克隆抗體，其特征在于其用于免疫印跡法和酶聯吸附測定法檢測經CRISPR/Cas9基因編輯體系處理過的組織細胞中的Cas9蛋白表達情況。
8.權利要求1所述的單克隆抗體，其特征在于可用于CRISPR/Cas9基因編輯體系中對外源Cas9的鑒定。
9.權利要求2所述的重組抗原，其特征在于該重組蛋白由優選的具有抗原性的Cas9蛋白片段及利于重組蛋白表達和純化的標簽序列組成。
10.按照權利要求2所述的重組抗原，其特征在于Cas9的重組抗原為包括1位到270位氨基酸的蛋白序列，用于純化的標簽是由5至7個組氨酸組成的。
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