[發明專利]一種檢測糞便中具核梭桿菌的核酸組合及其應用與試劑盒

在審

• 申請號: 201710101308.9
• 申請日: 2017-02-23
• 公開（公告）號: CN106591488A
• 公開（公告）日: 2017-04-26
• 發明（設計）人: 張良祿;董蘭蘭;姚希輝
• 申請（專利權）人: 武漢艾米森生命科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙)11371
• 代理人: 李進

1.一種用于檢測糞便中具核梭桿菌的核酸組合，其特征在于，所述核酸組合包括引物組合和探針；所述引物組合包括第一引物對、第二引物對和第三引物對，所述第一引物對的堿基序列如SEQ ID NO.1-2所示，所述第二引物對的堿基序列如SEQ ID NO.3-4所示，所述第三引物對的堿基序列如SEQ ID NO.5-6所示；所述探針包括第一探針、第二探針和第三探針；所述第一探針的堿基序列如SEQ ID NO.7所示，所述第二探針的序列如SEQ ID NO.8所示，所述第三探針的序列如SEQ ID NO.9所示；所述探針的5'端標記有熒光基團，所述探針3'端標記有淬滅基團，所述熒光基團為FAM、VIC、TET、JOE、HEX、CY3、CY5、ROX、RED610、TEXASRED、RED670、NED中的一種，所述淬滅基團為6-TAMRA、BHQ-1～3、和結合分子溝的非熒光淬滅劑中的一種。

2.如權利要求1所述的核酸組合在檢測糞便中具核梭桿菌的應用。

3.如權利要求1所述的核酸組合在制備癌癥早期檢測的試劑盒中的應用。

4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，所述癌癥包括結直腸癌、高風險癌前息肉。

5.如權利要求1所述的核酸組合在制備檢測具核梭桿菌試劑盒中的應用。

6.一種檢測糞便中具核梭桿菌的試劑盒，其特征在于，包括如權利要求1所述的用于檢測糞便中具核梭桿菌的核酸組合。

7.如權利要求6所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括樣品保存液、核酸提取液、PCR反應液、陽性質控品、陰性質控品、內標對照、標準品中的一種或多種。

8.如權利要求7所述的試劑盒，其特征在于，所述樣品保存液包括0.1-1mol/L的EDTA、0.5-3mol/L的Tris·HCl和0.05-0.15mol/L的NaCl。

9.如權利要求7所述的試劑盒，其特征在于，所述核酸提取液包括核酸裂解液、PVPP、蛋白酶K、RNA酶、DNA漂洗液和DNA洗脫液中的一種或多種。

10.如權利要求9所述的試劑盒，其特征在于，所述的核酸裂解液包括100-500mM Tris·HCl、20-100mM EDTA、0.4-1M NaCl和體積分數為1％-4％的SDS溶液。