[發明專利]一種鑒定評價芝麻枯萎病抗性水平的方法

有效

• 申請號: 201710099269.3
• 申請日: 2017-02-23
• 公開（公告）號: CN106967783B
• 公開（公告）日: 2020-05-19
• 發明（設計）人: 苗紅梅;常淑嫻;張海洋;段迎輝;曲文文;琚銘;趙瑞紅
• 申請（專利權）人: 河南省農業科學院芝麻研究中心
• 主分類號: C12Q1/18
• 分類號: C12Q1/18
• 代理公司: 鄭州聯科專利事務所(普通合伙) 41104
• 代理人: 時立新

本發明屬于作物品種抗病性評價及時領域，具體涉及一種用于芝麻的枯萎病抗性鑒定評價方法。該方法包括準備芝麻植株、制備浸染用分生孢子懸浮液、浸根接菌、芝麻品種枯萎病抗性鑒定評價等步驟。本申請以較為成熟的浸根感染法為基礎，可對不同生長階段的芝麻植株（2對真葉至現蕾期）進行接種。同時，由于接種用的枯萎病菌株濃度易于調整，因而能詳細分析病菌對芝麻幼苗的侵染過程及芝麻幼苗的應答過程，能夠準確鑒定和評價不同芝麻種質的抗病性以及不同菌株的致病力，為有效防控芝麻枯萎病提供了技術基礎，同時也為其他作物病害的防治提供了較好地參考借鑒。本申請具有較好的可重復性，鑒定結果穩定可靠，具有較好的科研應用價值。

技術領域

本發明屬于作物品種抗病性評價及時領域，具體涉及一種用于芝麻的枯萎病抗性鑒定評價方法。

背景技術

芝麻是我國重要的特色油料作物。芝麻枯萎病主要是由尖孢鐮刀菌芝麻專化型（Fusarium oxysporum f. sp. sesami，FOS）引起的，也是世界性芝麻病害。與莖點枯病并稱為芝麻生產中的兩大真菌病害。芝麻枯萎病常年發病率在15%左右，嚴重時可達30%以上，對產量和品質影響較大。

近年來，為檢測尖孢鐮刀菌芝麻專化型的致病力，評價芝麻種質對枯萎病菌的抗性水平，河南省農科院芝麻研究中心采用種子接菌方法，首次建立了芝麻枯萎病菌致病力的室內評價體系（仇存璞等，2014），為芝麻病害研究奠定了技術基礎。該方法采用基質拌菌，對芝麻萌發的種子進行人工接菌處理，可以客觀評價種子萌發至2對真葉時期芝麻抗枯萎病特性以及FOS病菌致病力水平。

研究也發現，采用種子接菌方法檢測芝麻種質的抗病性仍存在一定缺陷。利用該方法處理芝麻種子后，芝麻抗病水平在接種4周后（即芝麻栽培品種兩對真葉時期）趨于穩定，不利于芝麻病癥的進一步觀察；對于一些強致病力FOS菌株，大多數芝麻材料在子葉期就會全部死亡，致使枯萎病害癥狀表現不完全，并在一定程度上影響了病原菌致病過程觀察以及芝麻抗病、應答過程監測。因此，目前迫切需要建立一種新型的芝麻枯萎病抗性室內鑒定評價方法，在一定程度上替代大田病圃檢測方法，探明芝麻在不同發育時期對枯萎病菌的抗性特征，同時通過評價尖孢鐮刀菌芝麻專化型病菌對不同發育時期芝麻植株的侵染特點，最終為有效防控芝麻枯萎病害提供理論和技術支持。

發明內容

利用浸根接菌法，本發明目的在于提供一種較為通用的快速準確鑒定、評價芝麻枯萎病抗性的方法，從而為抗枯萎病芝麻種質篩選、致病菌株致病力鑒定及芝麻枯萎病防治等研究奠定技術基礎。

本發明所采取的技術方案詳述如下。

一種鑒定評價芝麻枯萎病抗性水平的方法，具體包括如下步驟：

（1）準備芝麻植株

根據試驗目的，挑選適量待測芝麻品種健康成熟種子，滅菌處理后，25℃~28℃、100~120rpm條件下振蕩培養至種子露白；

所述滅菌處理具體程序例如為：先用70%酒精處理30s，再3%的次氯酸鈉處理10~15min，最后無菌水沖洗3~5次；

將露白后芝麻種子播種于盛有無菌蛭石的容器中，所述容器例如容量為250mL的紙杯，每個紙杯中可播種10粒；

定期用改良Hoagland營養液進行澆灌，人工氣候培養箱培養，培養溫度25~28℃、相對濕度為60~80%、每天15h/9h光暗交替；培育1~2個月后可用于接菌處理（根據實驗設計及要求，芝麻植株為2對真葉期至現蕾期中某一生長階段）；

所述改良Hoagland營養液配方為：四水硝酸鈣945mg/L、硝酸鉀506mg/L、硝酸銨80mg/L、磷酸二氫鉀136mg/L、硫酸鎂493mg/L、鐵鹽溶液2.5mL和微量元素液5mL，pH=6.0；