[發明專利]一種鑒定評價芝麻枯萎病抗性水平的方法

有效

• 申請號: 201710099269.3
• 申請日: 2017-02-23
• 公開（公告）號: CN106967783B
• 公開（公告）日: 2020-05-19
• 發明（設計）人: 苗紅梅;常淑嫻;張海洋;段迎輝;曲文文;琚銘;趙瑞紅
• 申請（專利權）人: 河南省農業科學院芝麻研究中心
• 主分類號: C12Q1/18
• 分類號: C12Q1/18
• 代理公司: 鄭州聯科專利事務所(普通合伙) 41104
• 代理人: 時立新

1.一種鑒定評價芝麻枯萎病抗性水平的方法，其特征在于，該方法具體包括如下步驟：

（1）準備芝麻植株

挑選待測芝麻品種健康成熟種子，滅菌處理后，培養至種子露白；

將露白后芝麻種子播種于盛有無菌蛭石的容器中；

用營養液進行澆灌；培養1~2個月后用于接菌處理；

（2）制備浸染用分生孢子懸浮液

根據試驗目的，挑選尖孢鐮刀菌芝麻專化型菌株，培養制備分生孢子懸浮液，懸浮液中孢子數為：1×10⁶cfu/mL ~ 1×10⁷cfu/mL；

（3）浸根接菌

選擇步驟（1）中生長健壯一致的芝麻植株，洗去根部粘帶的蛭石；

將芝麻植株根系全部浸入步驟（2）所制備分生孢子懸浮液中10~30min；

將接菌后植株重新栽入蛭石中，培養，并定期澆灌營養液，保證植株生長需要的營養；

以清水浸泡同等時間的芝麻幼苗作為不接菌陰性對照，相同培養條件培養；

（4）芝麻品種枯萎病抗性鑒定評價，

對步驟（3）中接菌后芝麻植株的枯萎病發病情況進行定期調查，記錄發病株數及發病等級，計算枯萎病病情指數，并據此判定芝麻品種枯萎病抗性能力，或者對特定菌株的對芝麻的枯萎病致病能力進行判定。

2.如權利要求1所述鑒定評價芝麻枯萎病抗性水平的方法，其特征在于，步驟（1）、步驟（3）中所述營養液均為改良Hoagland營養液；其配方為：四水硝酸鈣945mg/L、硝酸鉀506mg/L、硝酸銨80mg/L、磷酸二氫鉀136mg/L、硫酸鎂493mg/L、鐵鹽溶液2.5mL和微量元素液5mL，pH=6.0；

所述鐵鹽溶液配方為：七水硫酸亞鐵2.78g和乙二胺四乙酸二鈉3.73g，蒸餾水500mL，pH=5.5；

所述微量元素液配方為：碘化鉀0.83mg/L、硼酸6.2mg/L、硫酸錳22.3mg/L、硫酸鋅8.6mg/L、鉬酸鈉0.25mg/L、硫酸銅0.025mg/L、氯化鈷0.025mg/L。

3.如權利要求1所述鑒定評價芝麻枯萎病抗性水平的方法，其特征在于，步驟（1）、步驟（3）中芝麻種子或芝麻植株的培養條件為：溫度25~28℃、相對濕度為60~80%、每天15h/9h光暗交替。

4.如權利要求1所述鑒定評價芝麻枯萎病抗性水平的方法，其特征在于，步驟（2）中所述懸浮液采用PDB液體培養基制備而成，

所述PDB液體培養基，每1000mL蒸餾水中含：馬鈴薯200g，葡萄糖20g。

5.如權利要求1所述鑒定評價芝麻枯萎病抗性水平的方法，其特征在于，所述尖孢鐮刀菌芝麻專化型菌株的培養條件為：28℃、160~180rpm振蕩培養。