[發明專利]細菌性莢膜多糖的純化方法有效
| 申請號： | 201710098943.6 | 申請日： | 2017-02-23 |
| 公開（公告）號： | CN107043431B | 公開（公告）日： | 2020-06-30 |
| 發明（設計）人： | 祝先潮;陳春光 | 申請（專利權）人： | 上海瑞宙生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C08B37/00 | 分類號： | C08B37/00 |
| 代理公司： | 上海翼勝專利商標事務所(普通合伙) 31218 | 代理人： | 翟羽 |
| 地址： | 201210 上海市浦東*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 細菌性 莢膜 多糖 純化 方法 | ||
1.細菌性莢膜多糖的純化方法，其特征在于，包括如下步驟：
（1）滅活劑處理肺炎鏈球菌發酵培養液，得到包含有細胞碎片、蛋白質、核酸和多糖的細菌溶解液；
（2）在步驟（1）獲得的細菌溶解液中加酸調節pH值至3.0~6.5，沉淀雜質，離心和微濾去除沉淀物獲得多糖澄清液，所述酸是磷酸、乙酸、鹽酸、硫酸或硝酸中的一種或幾種；
（3）用截留分子量10—100KDa的膜對步驟（2）獲得的多糖澄清液進行超濾換液并濃縮，獲得去除大部分可溶性蛋白質、核酸以及大顆粒雜質含量的莢膜多糖溶液；
（4）將步驟（3）獲得的莢膜多糖溶液組合使用復合型離子交換層析和羥基磷酸灰質鹽層析進行色譜層析，獲得純化的莢膜多糖溶液；所述的組合使用是指先使用復合型離子交換層析，后使用羥基磷酸灰質鹽層析或者先使用羥基磷酸灰質鹽層析，后使用復合型離子交換層析；所述復合型離子交換層析填料選自Capto Adhere、TOYOPEARL MX-Trp-650M、Cellufine MAX AminoButyl，所述羥基磷酸灰質鹽層析為CHT? CeramicHydroxyapatite；
（5）濃縮及超濾步驟（4）獲得的莢膜多糖溶液，并進行無菌過濾、保存。
2.根據權利要求1所述的細菌性莢膜多糖的純化方法，其特征在于，步驟（2）中微濾所用微濾膜的膜孔徑為0.22，0.45，0.65，1.0 um 中的任意一種。
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