[發(fā)明專利]一種枯草芽孢桿菌的新型培養(yǎng)方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710097165.9
• 申請(qǐng)日: 2017-02-22
• 公開（公告）號(hào): CN106834178A
• 公開（公告）日: 2017-06-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 麻林濤;王莉
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 麻林濤
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C12R1/125
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種枯草芽孢桿菌的培養(yǎng)方法，所述方法包括如下步驟：

S1：配制第一液體培養(yǎng)基；

S2：配制第二液體培養(yǎng)基；

S3：菌種培養(yǎng)得到第一培養(yǎng)液；

S4：繼續(xù)培養(yǎng)得到第二培養(yǎng)液，從而完成所述培養(yǎng)方法。

2.如權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)方法，其特征在于：所述步驟S1具體如下：

S1-1：分別稱取如下的基礎(chǔ)物：微量元素水溶液40-50ml、維生素E 1-2g、蘇氨酸300-400mg、L-脯氨酸200-300mg、葡萄糖3-4.5g、蔗糖2-4g、瓊脂5-6g、蛋白胨6-8g、酵母浸膏1.5-3g、10-12g大豆粉和牛肉膏3-5g；

S1-2：將上述基礎(chǔ)物加入到去離子水中，充分?jǐn)嚢瑁⒂萌ルx子水定容至1000ml，即得到所述第一液體培養(yǎng)基。

3.如權(quán)利要求2所述的培養(yǎng)方法，其特征在于：其中，所述微量元素水溶液是將4g硝酸鋅、3.5g硫酸鋅、3g硝酸鎂、1g氯化鈷、2g硝酸銅、2.5g氯化鈣、4g氯化錳、8g氯化亞鐵和3g氯化鐵充分溶解于1000ml蒸餾水中而得到的。

4.如權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的培養(yǎng)方法，其特征在于：所述步驟S2具體如下：

S2-1：同權(quán)利要求2中的所述步驟S1-1；

S2-2：將所述基礎(chǔ)物和25-40ml無機(jī)物混合液加入到去離子水中充分?jǐn)嚢瑁⒂萌ルx子水定容至1000ml且調(diào)節(jié)pH值為6.4-7.2，即得到所述第二液體培養(yǎng)基。

5.如權(quán)利要求4所述的培養(yǎng)方法，其特征在于：其中，所述無機(jī)物混合液是將5g Na₂SO₄、2g NaCl、12g K₂HPO₄、4g Na₃PO₄、7g NH₄Cl、2.5g硼酸、3g KNO₃和5g KI加入到1000ml蒸餾水中充分?jǐn)嚢枞芙舛玫降摹?/p>

6.如權(quán)利要求4-5任一項(xiàng)所述的培養(yǎng)方法，其特征在于：其中，步驟S2-2中將pH值調(diào)節(jié)為6.4-7.2，最優(yōu)選為6.8。。

7.如權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述的培養(yǎng)方法，其特征在于：所述步驟S3具體如下：

將枯草芽孢桿菌菌株進(jìn)行斜面試管培養(yǎng)，得到枯草芽孢桿菌菌落，然后使用接種環(huán)接1環(huán)接種于120ml所述第一液體培養(yǎng)基中，于溫度T1和轉(zhuǎn)速為140-160轉(zhuǎn)/分鐘下振蕩培養(yǎng)30-34小時(shí)，從而得到所述第一培養(yǎng)液；

其中，溫度T1為35-37℃。

8.如權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的培養(yǎng)方法，其特征在于：所述步驟S4具體如下：

按照1.5-1.9:100的體積比，將所述第一培養(yǎng)液接種于所述第二液體培養(yǎng)基中，并降溫至溫度T2，然后以160-170轉(zhuǎn)/分鐘的速度攪拌并通風(fēng)，培養(yǎng)18-22小時(shí)，從而得到所述第二培養(yǎng)液。

9.如權(quán)利要求8所述的培養(yǎng)方法，其特征在于：其中，溫度T2為28-32℃，且優(yōu)選T1-T2為5-7℃，最優(yōu)選T1-T2＝6℃。

10.如權(quán)利要求8-9任一項(xiàng)所述的培養(yǎng)方法，其特征在于：其中，通風(fēng)的通風(fēng)比為1:0.7-0.8。