[發明專利]一種基于焦磷酸測序檢測雙位點SNP的方法有效
| 申請號： | 201710097160.6 | 申請日： | 2017-02-22 |
| 公開（公告）號： | CN107043812B | 公開（公告）日： | 2020-11-10 |
| 發明（設計）人： | 劉丹;孫悅;陳立波 | 申請（專利權）人： | 武漢菲思特生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/6869 | 分類號： | C12Q1/6869 |
| 代理公司： | 上海精晟知識產權代理有限公司 31253 | 代理人： | 熊嫻;馮子玲 |
| 地址： | 430205 湖北省武漢市東湖新技*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 基于 磷酸 檢測 雙位點 snp 方法 | ||
1.一種基于焦磷酸測序檢測雙位點SNP的方法，其特征在于，具體包括以下步驟：
a、將待檢測DNA序列進行擴增、使用內部設有濾膜的中空的過濾柱進行DNA單鏈分離，其中待檢測DNA序列為穩定的DNA單鏈；穩定的DNA單鏈為濾膜上收集的連接有親合體的DNA單鏈或者濾液中收集的不帶有親合體的單鏈DNA；
b、將分離后的待測DNA單鏈樣品加入反應體系，且同時加入雙位點SNP對應的引物，經所述引物啟動互補鏈擴增，且分別經焦磷酸測序檢測與待測DNA單鏈互補堿基序列以確定待測SNP位點；
其中，所述對應不同位點的引物對應同一待測DNA序列的兩個待測SNP位點的擴增起始端至SNP位點的堿基序列至少有n堿基不同或距SNP位點的距離不同，n≥1。
2.根據權利要求1所述的基于焦磷酸測序檢測雙位點SNP的方法，其特征在于：n為1或2。
3.根據權利要求1所述的基于焦磷酸測序檢測雙位點SNP的方法，其特征在于：擴增起始位點為兩個SNP位點的5’端，或兩個SNP位點的3’端，或一個SNP位點的5’端與另一個SNP位點的3’端。
4.根據權利要求1所述的基于焦磷酸測序檢測雙位點SNP的方法，其特征在于：SNP位點的測序起始端設計有引物，其中一段引物帶有特定識別基團。
5.根據權利要求1所述的基于焦磷酸測序檢測雙位點SNP的方法，其特征在于：SNP位點為SNP位點或SNP位點互補鏈的配對堿基。
6.根據權利要求1所述的基于焦磷酸測序檢測雙位點SNP的方法，其特征在于：同一體系中的兩個SNP位點為同一段基因上的兩個SNP位點。
7.根據權利要求1所述的基于焦磷酸測序檢測雙位點SNP的方法，其特征在于：同一體系中的兩個SNP位點為兩段基因上的單個SNP位點。
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