[發(fā)明專利]氨基他達(dá)那非半抗原、人工抗原及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710096282.3
• 申請(qǐng)日: 2017-02-22
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN106905318B
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-03-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 盧宇靖;蔡森源;郭曉路;黃寶華;張焜
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣東工業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C07D471/14
• 分類號(hào): C07D471/14;C07K14/765;C07K1/107;G01N33/558
• 代理公司: 北京集佳知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227
• 代理人: 趙青朵

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及氨基他達(dá)那非半抗原、人工抗原及其制備方法。本發(fā)明半抗原在保留氨基他達(dá)那非基本結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上引入連接臂結(jié)構(gòu)和用于偶聯(lián)大分子的活性基團(tuán)，這樣既有利于其與大分子偶聯(lián)，又可以在偶聯(lián)后充分暴露本身分子結(jié)構(gòu)和分子量較小的氨基他達(dá)那非基本結(jié)構(gòu)，避免了其被大分子掩蔽而影響動(dòng)物機(jī)體的識(shí)別。本發(fā)明將氨基他達(dá)那非半抗原通過(guò)活性酯化法與蛋白質(zhì)偶聯(lián)制備人工抗原，偶聯(lián)比可達(dá)18.2，可用于氨基他達(dá)那非的免疫檢測(cè)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及氨基他達(dá)那非半抗原、人工抗原及其制備方法。

背景技術(shù)

氨基他達(dá)那非(Amino Tadalafil)，其化學(xué)式為C₂₁H₁₈N₄O₄，CAS登錄號(hào)為385769-84-6，是一種新型5-羥色胺(5-HT)再攝取抑制劑，為水溶性白色或灰白色粉末，其具有壯陽(yáng)、延時(shí)治療性功能障礙的功效。氨基他達(dá)那非通過(guò)抑制5-HT轉(zhuǎn)運(yùn)體，能有效抑制5-HT再攝取，提高突觸間隙5-HT濃度，激活突觸后膜5-HT2C和5-HT1A受體，發(fā)揮延遲射精作用，從而有效控制男性的早泄癥狀。但服用氨基他達(dá)那非后患者會(huì)產(chǎn)生頭痛、消化不良、頭暈、面色潮紅、鼻充血、背部疼痛及肌肉疼痛的不良反應(yīng)。

近年來(lái)，中成藥及保健品非法添加化學(xué)物質(zhì)越來(lái)越引起人們的關(guān)注，不法藥商為了謀取非法利益，通過(guò)非法加入氨基他達(dá)那非，使療效緩和的中成藥或保健品具有了暫時(shí)的速效、高效或特效，增加銷量，獲取非法高額利潤(rùn)。但作為患者，在長(zhǎng)期不知情的情況下服用含有氨基他達(dá)那非的中成藥或保健品會(huì)引起嚴(yán)重的副作用。目前，檢測(cè)中成藥或保健品中是否含有氨基他達(dá)那非成分，采用的仍是傳統(tǒng)的檢驗(yàn)方法，須將提取的樣品帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行分析，或是使用大型的試驗(yàn)車，這樣都很不方便，而且反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng)，實(shí)驗(yàn)耗資較大。

免疫分析是一種基于抗原抗體特異性識(shí)別和結(jié)合反應(yīng)的分析方法，具有靈敏、對(duì)儀器要求不高、操作簡(jiǎn)單、成本低等優(yōu)點(diǎn)。氨基他達(dá)那非屬于分子量小于1000的小分子化合物，本身不具備反應(yīng)性和免疫原性，為了實(shí)現(xiàn)氨基他達(dá)那非的免疫檢測(cè)，不僅需要合成具備高效價(jià)的氨基他達(dá)那非抗原，而且還需要篩選特異性強(qiáng)、敏感度高的氨基他達(dá)那非單克隆抗體。但是目前尚沒(méi)有有關(guān)氨基他達(dá)那非單克隆抗體的相關(guān)報(bào)道。對(duì)于技術(shù)人員來(lái)說(shuō)高效價(jià)的氨基他達(dá)那非抗原的設(shè)計(jì)仍是難點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明提供了氨基他達(dá)那非半抗原、人工抗原及其制備方法。本發(fā)明半抗原在保留氨基他達(dá)那非基本結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上引入連接臂結(jié)構(gòu)和用于偶聯(lián)大分子的活性基團(tuán)，這樣既有利于其與大分子偶聯(lián)，又可以在偶聯(lián)后充分暴露本身分子結(jié)構(gòu)和分子量較小的氨基他達(dá)那非基本結(jié)構(gòu)，避免了其被大分子掩蔽而影響動(dòng)物機(jī)體的識(shí)別。本發(fā)明將氨基他達(dá)那非半抗原通過(guò)活性酯化法將半抗原與蛋白質(zhì)偶聯(lián)制備人工抗原，偶聯(lián)比可達(dá)18.2，可用于氨基他達(dá)那非的免疫檢測(cè)。

為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案：

本發(fā)明提供了一種氨基他達(dá)那非半抗原，其分子結(jié)構(gòu)式如式I或式II所示：

其中，n為1、2或3，m為1、2或3。

本發(fā)明還提供了式I所示氨基他達(dá)那非半抗原的制備方法，包括如下步驟：

氨基他達(dá)那非與環(huán)形酸酐反應(yīng)，得到氨基他達(dá)那非半抗原；

環(huán)形酸酐為丁二酸酐、戊二酸酐或己二酸酐。

本發(fā)明還提供了式II所示氨基他達(dá)那非半抗原的制備方法，包括如下步驟：

氨基他達(dá)那非與環(huán)形酸酐反應(yīng)，得到氨基他達(dá)那非衍生物；

氨基他達(dá)那非衍生物與脂肪類二胺反應(yīng)，得到氨基他達(dá)那非半抗原；

環(huán)形酸酐為丁二酸酐、戊二酸酐或己二酸酐；