[發明專利]利用雄蜂聚集區評估東方蜜蜂野生種群數量的方法

有效

• 申請號: 201710094486.3
• 申請日: 2017-02-21
• 公開（公告）號: CN106818641B
• 公開（公告）日: 2019-12-20
• 發明（設計）人: 丁桂玲;黃家興;張紅;劉彥杰;孫成;安建東
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院蜜蜂研究所
• 主分類號: A01K67/02
• 分類號: A01K67/02
• 代理公司: 11371 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙)
• 代理人: 錢學宇

本發明提供了利用雄蜂聚集區評估東方蜜蜂野生種群數量的方法，所述方法中，首先對雄蜂引誘確定聚集區，然后在雄蜂聚集區通過粘取獲得雄蜂樣本，最后對于雄蜂樣本進行DNA提取和遺傳分析，對雄蜂進行種群歸屬，再計算得出特定區域范圍內蜂群的數量。本發明方法具有操作步驟簡便，且能夠高效、準確定位東方蜜蜂DCA，這也為現有蜜蜂研究填補了空白；同時，本發明方法也能夠實現對于雄蜂的有效誘捕；進一步的，本發明中通過對于東方蜜蜂的多樣性位點進行系統分析、選擇以及遺傳性分析和計算，能夠有效確定特定區域范圍內的蜂群數量，這不僅填補了現有技術中對于東方蜜蜂多樣性位點研究的空白，同時也能夠有效的對于區域內蜜蜂種群數量進行有效的測算。

技術領域

本發明涉及野生蜜蜂種群評估領域，具體而言，涉及利用雄蜂聚集區評估東方蜜蜂野生種群數量的方法。

背景技術

為了評估授粉昆蟲多樣性的變化情況以及授粉昆蟲是否達到特定區域內植物授粉所需的數量，常常需要統計蜂群特別是野生蜂群的密度。但野外蜂群一般較為隱蔽，不太容易發現，無法通過直接統計蜂群數量的方法獲得數據。

在蜜蜂的交配季節，來自多個蜂群的大量雄蜂匯集在一起形成雄蜂聚集區(DroneCongregation Areas，簡稱DCA)，雄蜂在此區域與處女蜂王進行交配。來自周邊區域的大量蜂群的雄蜂在DCA聚集，使得DCA中雄蜂數量可達數百到上萬只。在DCA收集雄蜂樣品，根據蜜蜂的單倍二倍性生殖特點(即雄蜂基因全部來自蜂王)，當使用具有足夠變異信息的微衛星位點時，便可以準確地把樣品中的雄蜂分配到不同的蜂王，從而可以利用多態性豐富的位點對雄蜂進行多樣性分析，即可評估特定區域范圍內的蜂群數量。目前，該方案已用于野生西方蜜蜂(Apis mellifera)的蜂群數量評估。

利用DCA準確推測特定區域的蜂群數量需要滿足三個條件：首先，可以在野外高效地定位到DCA的分布地點；其次，可以在DCA收集到大量樣品；最后，需要使用多態性較好的位點對樣品進行基因型數據的收集。

目前，蜜蜂屬的9個蜜蜂種中，對西方蜜蜂的研究最為詳細。西方蜜蜂雄蜂喜歡聚集在開闊的場地，周圍的樹木較矮，雄蜂聚集高度在10－30m。東方蜜蜂是飼養數量處于第二位的蜂種，分布范圍較廣，野生種群數量較多，但對于該蜂種的研究相對較少。

Punchihewa等(Congregation of Apis cerana indica Fabricius 1798dronesin the canopy of trees in Sri Lanka，Apidologie，21，201－208)在斯里蘭卡發現東方蜜蜂的雄蜂聚集在靠近大樹的地方，在靠近樹冠的露天區域飛行，不會跟隨囚禁的蜂王飛到樹冠頂部或旁邊，飛行高度為4－8m。但在日本，Fujiwara等人(Drone congregation ofApis cerana japonica above large trees.Apidologie，25，331－337)發現東方蜜蜂雄蜂聚集在突出的樹木上方的露天區域，雄蜂外出飛行高峰時間為13：20－16：00，估計雄蜂聚集的高度在30－70m，在櫸樹之外的其他樹上方未發現雄蜂聚集。

由于關于東方蜜蜂雄蜂聚集區的數據較少，并且不同的報道內容很不一致，目前對于東方蜜蜂DCA的分布特點尚無定論，導致DCA的發現屬于隨機事件。在找到DCA后進行收集雄蜂樣品時，仍按照西方蜜蜂的方法，尚未形成針對東方蜜蜂雄蜂飛行特點的高效取樣方法。對收集的樣品進行分析時，亦尚未篩選出多態性豐富的多個位點。

有鑒于此，特提出本發明。

發明內容