[發明專利]利用雄蜂聚集區評估東方蜜蜂野生種群數量的方法

有效

• 申請號: 201710094486.3
• 申請日: 2017-02-21
• 公開（公告）號: CN106818641B
• 公開（公告）日: 2019-12-20
• 發明（設計）人: 丁桂玲;黃家興;張紅;劉彥杰;孫成;安建東
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院蜜蜂研究所
• 主分類號: A01K67/02
• 分類號: A01K67/02
• 代理公司: 11371 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙)
• 代理人: 錢學宇

1.一種利用雄蜂聚集區評估東方蜜蜂野生種群數量的方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：

a)在由樹木組成的封閉區域內，將下方拴有過濾嘴的充氣氣球置于所述封閉區域的露天地帶或較高的樹枝處，其中，所述過濾嘴中裝載有蜂王物質；

然后，在5～15m的高度范圍內調整充氣氣球的高度，并確定雄蜂集中分布區域，即定位為雄蜂聚集區，并作為取樣點；

b)將下方拴有過濾嘴的充氣氣球置于雄蜂聚集區，其中，拴繩上涂抹有膠水；然后，通過粘取捕獲雄蜂，并將采集到的雄蜂樣本保存；

c)提取雄蜂樣本DNA，并篩選多態性豐富的位點，引物進行PCR擴增，然后對PCR產物進行遺傳分析，并評估雄蜂樣本所屬蜂群的數量；然后，根據雄蜂的平均飛行距離，計算出特定區域范圍內蜂群的種群數量。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述蜂王物質為9-ODA稀釋液。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述9-ODA稀釋液是由9-ODA溶于異丙醇和超純去離子水中制備得到的。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述充氣氣球的下方拴有1～3個過濾嘴；

其中，當過濾嘴的數量大于一個時，多個過濾嘴采用等間距設置。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，雄蜂的捕獲集中于無風、溫暖的晴朗天氣進行；

和，在12:00～14:00的時間范圍內。

6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，采集到的雄蜂樣本是放入乙醇溶液中進行保存的。

7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述提取雄蜂樣本DNA為：取下每只雄蜂的后足，然后進行DNA提取。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述DNA提取為采用5～10％Chelex進行提取。

9.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述對PCR產物進行遺傳分析為：將擴增后所得PCR產物稀釋10～20倍后，再使用遺傳分析儀進行遺傳分析。