[發明專利]一種檢測MTHFR基因突變的核酸組合及其應用和試劑盒

有效

• 申請號: 201710091983.8
• 申請日: 2017-02-21
• 公開（公告）號: CN106801099B
• 公開（公告）日: 2020-08-14
• 發明（設計）人: 廖瑋;莫亞勤;林曉燕;張晨光
• 申請（專利權）人: 北京易活生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12N15/11
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371
• 代理人: 苗燕

1.一種檢測MTHFR基因突變的核酸組合，其特征在于，其包括SEQ ID NO.1-2所示的下游引物、SEQ ID NO.3所示的上游引物以及SEQ ID NO.4所示的捕獲探針，所述下游引物的5’端或所述上游引物的5’端標記有用于結合催化酶的親和物。

2.根據權利要求1所述的檢測MTHFR基因突變的核酸組合，其特征在于，所述親和物為地高辛、異硫氰酸熒光素和生物素中的任意一種。

3.權利要求1或2所述的檢測MTHFR基因突變的核酸組合在制備用于檢測MTHFR基因突變的試劑盒中的應用。

4.一種試劑盒，其特征在于，其包括權利要求1或2所述的檢測MTHFR基因突變的核酸組合。

5.根據權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括用于將所述核酸組合的所述捕獲探針固定至檢測孔板的固定物，所述固定物包括導電聚合物和離子化合物；

所述導電聚合物為選自吡咯、苯胺和噻吩中的任意一種；

所述離子化合物為選自氯化鈉和氯化鉀中的任意一種。

6.根據權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括所述催化酶，所述催化酶是帶有標記物的辣根過氧化物酶或堿性磷酸酶，所述標記物用于與所述親和物結合，所述標記物為地高辛抗體、異硫氰酸熒光素抗體以及鏈霉親和素中的一種。

7.根據權利要求6所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括所述催化酶的底物；

當所述催化酶為所述辣根過氧化物酶時，所述底物是TMB、ABTS和OPD中的任意一種；

當所述催化酶為所述堿性磷酸酶時，所述底物是BCIP和NBT的組合物、對硝基苯磷酸鹽、4-硝基苯磷酸二鈉、萘酚AS-BI磷酸鹽以及萘酚-AS-MX-磷酸鹽中的任意一種。

8.根據權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括洗液A和洗液B，所述洗液A是含SDS的SSC緩沖液，所述洗液B是含Tween20的PBS緩沖液。

9.根據權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括PCR反應緩沖液、dNTPs、Taq DNA聚合酶和Mg²⁺。