[發(fā)明專利]一種魚卵、仔稚魚分類鑒定的方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201710086342.3 | 申請日： | 2017-02-17 |
| 公開（公告）號： | CN106834473A | 公開（公告）日： | 2017-06-13 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 朱書禮;李新輝;楊計平;李捷;李躍飛;武智;帥方敏 | 申請（專利權(quán)）人： | 中國水產(chǎn)科學(xué)研究院珠江水產(chǎn)研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京華仁聯(lián)合知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司11588 | 代理人： | 覃紅麗 |
| 地址： | 510380 廣東*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 魚卵 仔稚魚 分類 鑒定 方法 | ||
1.一種魚卵、仔稚魚分類鑒定的方法，包括以下步驟：
(1)采集調(diào)查水域的成魚樣本，并對成魚樣本進(jìn)行分類鑒定，將已分類鑒定的各種魚類提取DNA，并對COⅠ序列分別進(jìn)行PCR擴(kuò)增測序，據(jù)此建立該調(diào)查水域魚類的COⅠ序列數(shù)據(jù)庫；
(2)將調(diào)查采集到的魚卵、仔稚魚樣本編號，用相同方法對魚卵、仔稚魚COⅠ序列進(jìn)行擴(kuò)增測序；
(3)將魚卵、仔稚魚COⅠ序列測序結(jié)果與已建立的COⅠ序列數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比對分析，從而鑒定魚卵、仔稚魚的種類。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種魚卵、仔稚魚分類鑒定的方法，其特征在于：步驟(1)中所述DNA提取方法為：取成魚新鮮肌肉或鰭條組織，用無水乙醇固定，蛋白酶K消化，酚-仿常規(guī)方法抽提DNA，-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種魚卵、仔稚魚分類鑒定的方法，其特征在于：COⅠ序列通用擴(kuò)增引物為：Forward primer：5-TCAACCAACCACAAAGACATTGGCAC-3，Reverse primer：5-TAGACTTCTGGGTGGCCAAAGAATCA-3。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種魚卵、仔稚魚分類鑒定的方法，其特征在于：所述的PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系為：95℃預(yù)變性3分鐘；每一個循環(huán)94℃30秒，56℃30秒，72℃50秒，共30個循環(huán)；最后72℃延伸6分鐘；PCR產(chǎn)物經(jīng)1％瓊脂糖凝膠電泳檢測后，用純化試劑盒回收，測序。
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