[發明專利]一種腸γδT細胞的分離方法在審
| 申請號： | 201710084479.5 | 申請日： | 2017-02-16 |
| 公開（公告）號： | CN106754707A | 公開（公告）日： | 2017-05-31 |
| 發明（設計）人： | 楊輝 | 申請（專利權）人： | 南京市兒童醫院 |
| 主分類號： | C12N5/0783 | 分類號： | C12N5/0783 |
| 代理公司： | 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙)11350 | 代理人： | 湯東鳳 |
| 地址： | 210000 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 細胞 分離 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種腸γδT細胞的分離方法,其特征在于，包括以下步驟：
1)、收集動物的腸淋巴細胞，離心，去掉上清液，生理鹽水懸浮腸淋巴細胞；
2)、用熒光標記的抗γδTCR抗體標記收集到的腸淋巴細胞，然后加入抗熒光微珠標記的抗FITC單克隆抗體，然后上磁式細胞分選儀優化分選，收集陽性選擇的細胞，即得到γδT細胞。
2.如權利要求1所述的腸γδT細胞的分離方法,其特征在于，所述步驟1)中采用腸系膜淋巴管插管法收集動物的腸淋巴細胞。
3.如權利要求2所述的腸γδT細胞的分離方法,其特征在于，所述步驟2)中采用異硫氰酸熒光素交聯的抗γδTCR單克隆抗體標記收集到的腸淋巴細胞，每l×108個腸淋巴細胞加100μl異硫氰酸熒光素交聯的抗γδTCR單克隆抗體，4℃孵育30分鐘，用緩沖液洗2次。
4.如權利要求2所述的腸γδT細胞的分離方法,其特征在于，所述步驟2)中每l×108個腸淋巴細胞加100μl抗熒光微珠標記的抗FITC單克隆抗體，4℃孵育15分鐘，用緩沖液洗1次。
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