[發明專利]一種靈芝復合免疫劑的生產方法

在審

• 申請號: 201710083299.5
• 申請日: 2017-02-16
• 公開（公告）號: CN106754432A
• 公開（公告）日: 2017-05-31
• 發明（設計）人: 劉鐵平;孫勇
• 申請（專利權）人: 江蘇中祥高科技實業有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A61K36/481;A61P37/04;C12R1/645
• 代理公司: 鎮江京科專利商標代理有限公司32107
• 代理人: 夏哲華

1.一種富鈣靈芝菌絲體的生產方法，包括以下步驟：

A:芝深層發酵培養

a、靈芝菌種培養：培養溫度為25～26℃，

取靈芝菌種在菌種培養基中培養20～30天，所述菌種培養基的配方組成為：馬鈴薯200～250g、葡萄糖20～25g、磷酸二氫鉀3～4g、七水硫酸鎂1.5～2g、維生素B110～20mg、瓊脂18～20g、水1000ml；

b、搖床種：保持溫度在25～26℃，在30L攪拌罐中裝入所述步驟1)中培養有靈芝菌種的菌種培養基，用水稀釋，然后置于振蕩器上，攪拌3～4天，控制攪拌速度為100～120轉/min；

c、一級放大：保持溫度在25～26℃，將所述步驟b中稀釋攪拌后的培養基負壓吸入300L種子罐中，培養2～3天；

d、二級放大：保持溫度在25～26℃，將所述步驟c中攪拌后的培養基負壓吸入1.5噸的種子罐中，培養2～3天；

e、發酵培養：保持溫度在25～26℃，將所述步驟d中培養后的培養基負壓吸入7噸的發酵罐中，并加入發酵培養基發酵；

B、將7噸發酵罐中的靈芝發酵原液升溫至45~55℃，加入20000u/g的酸性纖維素酶，加入量為發酵罐實際裝量的0.0001~0.0004%，攪拌酶解3~4小時，得到靈芝酶解液；

C、將上述靈芝酶解液降至40~45℃，并加入質量濃度為10%的NaOH溶液，調節pH至7.0~9.0，加入發酵罐實際裝量的0.006~0.012%的復合蛋白酶，攪拌酶解3~5小時，升溫至85~95℃，滅酶活10~30分鐘；

D、板框壓濾：將所述步驟C酶解靈芝混合液取出，用50～60kg的壓力壓濾，除去固體物，得到靈芝酶解原液；

E、經過板框壓濾后形成靈芝菌絲體，然后對靈芝菌絲體真空干澡并粉碎得到靈芝菌絲體粉；

F、將靈芝菌絲體粉配伍黃芪粉得到靈芝復合免疫劑。

2.按照權利要求1所述的富鈣靈芝菌絲體的生產方法，其特征在于：按質量百分數計，所述發酵培養基的配方組成為：玉米粉1～3％、蔗糖2～4％、磷酸二氫鉀0.01～0.02％、硫酸銨0.2～0.3％、酵母粉0.2～0.4％、豆油0.05～0.1％、余量為水。

3.按照權利要求1所述的富鈣靈芝菌絲體的生產方法，其特征在于：所述步驟C中復合蛋白酶的質量組成為：

10萬u/g的中性蛋白酶35%

20萬u/g的堿性蛋白酶 35%

10萬u/g胰蛋白酶 10%

10萬u/g的木瓜蛋白酶15%

10萬u/g的糖肽酶 5%。

4.按照權利要求1所述的富鈣靈芝菌絲體的生產方法，其特征在于：所述步驟A中e工序中，待達到以下標準時，發酵結束：待靈芝菌絲上無明顯芽頭和鎖狀聯合現象，且菌絲變細，菌絲原生質凝集，菌絲有自溶現象發生時。

5.按照權利要求1所述的富鈣靈芝菌絲體的生產方法，其特征在于：所述步驟A中e工序中，待達到以下標準時，發酵結束：菌絲濕重達到15～20％。

6.按照權利要求1所述的富鈣靈芝菌絲體的生產方法，其特征在于：所述步驟A中e工序中，待達到以下標準時，發酵結束：發酵原液的pH值為3.0～3.5。