[發明專利]青岡樹組織培養的快速繁殖方法

在審

• 申請號: 201710079760.X
• 申請日: 2017-02-15
• 公開（公告）號: CN106797888A
• 公開（公告）日: 2017-06-06
• 發明（設計）人: 唐春艷;陳素云
• 申請（專利權）人: 唐春艷;陳素云
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 廣西南寧匯博專利代理有限公司45114
• 代理人: 蘭如康

1.一種青岡樹組織培養的快速繁殖方法，其特征在于：包括外植體選擇、外植體處理、初始芽誘導培養、增殖培養、壯芽培養和生根培養工序，采集半木質化、生長健壯的當年生青岡樹嫩枝作為外植體，對外植體進行修剪、滅菌消毒處理后接種于初始芽誘導培養基中獲取初始芽，再將初始芽接種于增殖培養基中經過3-4個周期增殖培養，形成叢生芽，將叢生芽接入壯芽培養基中培養，最后將高≥2cm的單芽插入生根培養基中誘導生根，具體操作步驟如下：

（1）外植體選擇：采集半木質化、生長健壯的當年生青岡樹嫩枝作為外植體；

（2）外植體處理：將外植體置于自來水下沖洗10-15 min，然后去除外植體葉片，再將外植體浸泡在體積濃度 0.1%的升汞溶液中，控制浸泡時間15-20 min，最后用純凈水洗凈藥物，將外植體裁成帶至少1個腋芽，1.5-3cm長的莖段，視莖段木質化程度分類置放容器內，備用；

（3）初始芽誘導培養：將步驟（2）得到的外植體接種于初始芽誘導培養基中培養，培養30-35 d，初始芽萌發、生長；

（4）增殖培養：將高≥1cm的初始芽接入增殖培養基中進行增殖培養，35-40 d轉接一次，循環往復，經3-4個周期的培養，形成叢生芽；

（5）壯芽培養：將步驟（4）得到的叢生芽進行切割，4-5顆芽/叢，插入壯芽培養基中，培養35-40 d，形成壯芽；

（6）生根培養：將步驟（5）得到的高≥2cm的單芽插入生根培養基中誘導生根；余下小芽叢再次接種于步驟（4）的增殖培養基中繼續增殖，然后再重復步驟（5），循環往復，獲得大量壯芽。

2.根據權利要求1所述的青岡樹組織培養的快速繁殖方法，其特征在于：所述的初始芽誘導培養基的配方為：1/2改良WPM培養基+IBA 2.0-3.0 mg/L+6-BA 1.0-2.0 mg/L+ZT 1.5-2.0 mg/L+ VC 15 mg/L+葉酸10mg/L+VB₂ 15 mg/+瓊脂3.0 g/L+卡拉膠25 g/L。

3.根據權利要求1所述的青岡樹組織培養的快速繁殖方法，其特征在于：所述的增殖培養基的配方為：改良WPM培養基+6-BA 6.0-8.0 mg/L+IBA 2.0-3.0 mg/L+ZT 0.5-1.0 mg/L+VC 15 mg/L+VB₂ 15 mg+L-半胱氨酸 20 mg/L+瓊脂 3.6 g/L+卡拉膠 30 g/L。

4.根據權利要求1所述的青岡樹組織培養的快速繁殖方法，其特征在于：所述的壯芽培養基的配方為：改良WPM培養基+6-BA 3.0-4.0 mg/L+IBA 1.0-1.5 mg/L+VC 15 mg/L+VB₂ 15 mg+L-半胱氨酸 20 mg/L+瓊脂 3.5 g/L+卡拉膠 25 g/L。

5.根據權利要求1所述的青岡樹組織培養的快速繁殖方法，其特征在于：所述的生根培養基的配方為：1/2改良WPM培養基+6-BA 1.5-2.5 mg/L+IBA 1.0-1.5 mg/L+瓊脂 3.5 g/L+卡拉膠 30 g/L。