[發(fā)明專利]一種重組酵母菌株及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710069084.8
• 申請(qǐng)日: 2017-02-08
• 公開（公告）號(hào): CN106754448B
• 公開（公告）日: 2020-07-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李霞;陳艷;肖文海;王穎;姚明東;元英進(jìn)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 天津大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/19
• 分類號(hào): C12N1/19;C12N9/14;C12N9/88;C12N9/04;C12P7/04;C12P5/00;C12P7/64;C12P7/40;C12P33/00;C12R1/865
• 代理公司: 北京集佳知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227
• 代理人: 趙青朵

1.一種重組釀酒酵母菌株，其特征在于，以敲除YPL062W基因的CEN.PK2-1C釀酒酵母為底盤細(xì)胞，所述重組釀酒酵母菌株為發(fā)酵生產(chǎn)香葉醇、香葉基香葉醇、青蒿二烯、脂肪酸、酵母固醇中一種或兩種以上產(chǎn)物的釀酒酵母菌株；

所述發(fā)酵生產(chǎn)香葉醇的重組釀酒酵母菌株包含經(jīng)底盤細(xì)胞自身同源重組整合到其基因組上的如下基因片段：

酵母trp1位點(diǎn)上游同源序列、GAL1啟動(dòng)子、香葉醇合成酶編碼基因GES、PGK1終止子、酵母trp1位點(diǎn)下游同源序列順次拼接而成的基因片段1；

酵母leu2位點(diǎn)上游同源序列、LEU2標(biāo)記、ACT1終止子、截短的HMG-CoA還原酶基因tHMGR1、GAL10啟動(dòng)子、酵母leu2位點(diǎn)下游同源序列順次拼接而成的基因片段2；

所述發(fā)酵生產(chǎn)青蒿二烯的重組釀酒酵母菌株包含經(jīng)底盤細(xì)胞自身同源重組整合到其基因組上的如下基因片段：

酵母leu2位點(diǎn)上游同源序列、LEU2標(biāo)記、ACT1終止子、截短的HMG-CoA還原酶基因tHMGR1、GAL10啟動(dòng)子、酵母leu2位點(diǎn)下游同源序列順次拼接而成的基因片段2；

酵母trp1位點(diǎn)上游同源序列、GAL1啟動(dòng)子、青蒿二烯合成酶編碼基因ADS、PGK1終止子、酵母trp1位點(diǎn)下游同源序列順次拼接而成的基因片段3；

所述發(fā)酵生產(chǎn)香葉基香葉醇的重組釀酒酵母菌株包含經(jīng)底盤細(xì)胞自身同源重組整合到其基因組上的如下基因片段：

酵母leu2位點(diǎn)上游同源序列、LEU2標(biāo)記、ACT1終止子、截短的HMG-CoA還原酶基因tHMGR1、GAL10啟動(dòng)子、GAL1啟動(dòng)子、香葉基香葉醇合成酶編碼基因GGPPS、GPM1終止子、酵母leu2位點(diǎn)下游同源序列順次拼接而成的基因片段4；

所述發(fā)酵生產(chǎn)酵母固醇的重組釀酒酵母菌株包含經(jīng)底盤細(xì)胞自身同源重組整合到其基因組上的如下基因片段：

酵母leu2位點(diǎn)上游同源序列、LEU2標(biāo)記、ACT1終止子、截短的HMG-CoA還原酶基因tHMGR1、GAL10啟動(dòng)子、酵母leu2位點(diǎn)下游同源序列順次拼接而成的基因片段2；

所述脂肪酸為C16:0飽和脂肪酸和C16:1不飽和脂肪酸。

2.權(quán)利要求1所述酵母菌株在發(fā)酵生產(chǎn)香葉醇、香葉基香葉醇、青蒿二烯、脂肪酸、酵母固醇中一種或兩種以上產(chǎn)物中的應(yīng)用；所述脂肪酸為C16:0飽和脂肪酸和C16:1不飽和脂肪酸。