[發明專利]嬰幼兒食品及奶粉中多聚果糖含量的離子色譜法測定方法

在審

• 申請號: 201710067924.7
• 申請日: 2017-02-07
• 公開（公告）號: CN106706813A
• 公開（公告）日: 2017-05-24
• 發明（設計）人: 吳玉平;張鳳霞;徐娟;田燕
• 申請（專利權）人: 中檢科（北京）測試技術有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/64
• 代理公司: 北京格旭知識產權代理事務所(普通合伙)11443
• 代理人: 雒純丹

1.一種含多聚果糖制品中多聚果糖含量的測定方法，該方法包括：

(1)將含多聚果糖的溶液與淀粉酶接觸，得到第一溶液；

(2)將等量的兩份第一溶液，分別與葡聚酶/果糖酶復合酶溶液和醋酸鹽緩沖液接觸，得到第二溶液和第三溶液；

(3)將第二溶液和第三溶液冷卻處理；

(4)將步驟(3)冷卻處理后的第二溶液和第三溶液稀釋，得到稀釋液A和稀釋液B；以及

(5)采用離子色譜法測試稀釋液A中的果糖濃度，稀釋液B中的蔗糖濃度和果糖濃度，計算得到多聚果糖的含量。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(4)中，將驟(3)冷卻處理后的第二溶液和第三溶液稀釋至果糖和/或蔗糖的線性區間是0.5～20μg/mL，然后0.20-0.30μm濾膜過濾，優選采用0.22μm濾膜過濾。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述離子色譜法，流動相：A為H₂O，B為100mM NaOH，C為100mM NaOH+500mM NaHAC；

梯度洗脫條件為：0-20min，A：B：C＝90:10：0；20-25min，A：B：C＝0:0：100；25-50min，A：B：C＝90:10：0。

4.根據權利要求1-3任一項所述的方法，其特征在于，步驟(1)中，將含多聚果糖的溶液與淀粉酶在40-80℃，優選60℃水浴振蕩25-60分鐘，優選30分鐘，然后冷卻；其中，淀粉酶的用量為：8-9g/L，優選8.33g/L。

5.根據權利要求1-4任一項所述的方法，其特征在于，所述醋酸鹽緩沖液醋酸根離子濃度為0.2mol/l。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述葡聚酶/果糖酶復合酶溶液為含有葡聚酶和果糖酶的醋酸鹽緩沖液，其中葡聚酶含量為10-15mg/100ml醋酸鹽緩沖液，果糖酶含量為5-10mg/100ml醋酸鹽緩沖液。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，步驟(2)中，所述葡聚酶/果糖酶復合酶溶液與第一溶液的體積比用量為1:1，所述醋酸鹽緩沖液與第一溶液的體積比用量為1:1。

8.根據權利要求1-7任一項所述的方法，其特征在于，步驟(2)中，將等量的兩份第一溶液，分別與葡聚酶/果糖酶復合酶溶液和醋酸鹽緩沖液，50-70℃水浴振蕩50-70分鐘，優選60℃水浴振蕩60分鐘。

9.根據權利要求1-8任一項所述的方法，其特征在于：

多聚果糖LcFOS的含量由下述公式計算得到

LcFOS＝K×(F-S/1.9)；

其中，K為換算系數，由下述公式計算得到，

在該公式中，n為多聚果糖的平均聚合度；

F為酶解得到的果糖的含量，單位為毫克每百克(mg/100g)，由下述公式計算得到，

c_a為稀釋液A中的果糖的濃度，單位為微克每毫升(μg/mL)；

c_b為稀釋液B中的果糖的濃度，單位為微克每毫升(μg/mL)；

f為第二溶液和第三溶液的稀釋倍數；

m為含多聚果糖的溶液中的固含量，單位為克(g)；

S為蔗糖的含量，單位為毫克每百克(mg/100g)：

$S=\frac{c_s\×f}{1000\×m}\×\frac{20}{10}\×50\×100$

c_s為稀釋液B中的蔗糖的濃度，單位為微克每毫升(g/mL)；

f為第三溶液的稀釋倍數；

m為含多聚果糖的溶液中的固含量，單位為克(g)。

10.根據權利要求9所述的方法，其特征在于，當f＝100時，蔗糖含量的計算公式為為：S＝1000cS/m。