[發明專利]一種重組蛋白及藥物組合物與應用

有效

• 申請號: 201710059842.8
• 申請日: 2017-01-24
• 公開（公告）號: CN106632694B
• 公開（公告）日: 2021-02-12
• 發明（設計）人: 李建強;葛君;陳思;陸鳳;任蘇林;周童;戚鳳春;趙志強;劉俊林;殷相平;蒲秀英;徐繼英;王建鋒;焦文強
• 申請（專利權）人: 南京益康生物醫藥有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;A61K39/12;A61P31/20;A61P35/00
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 趙青朵

1.一種重組蛋白，其特征在于，其為16型人乳頭瘤病毒E6和E7變形體的融合多肽；

所述16型人乳頭瘤病毒E6和E7變形體的融合多肽的氨基酸序列排列依次為HPV16型E6蛋白N端第1-83位氨基酸序列、HPV16 型E7蛋白 N端的第1-62位氨基酸序列、HPV16型 E6蛋白 C端的第69-151位氨基酸序列、HPV16 型E7 蛋白C端的第48-98位氨基酸序列，其中HPV16型E6的突變位點為F47R、L50G、C63G、C106R；HPV16 E7 的突變位點為Y23G、C24G、Y25G、C58G、C91G；

所述16型人乳頭瘤病毒E6和E7變形體的融合多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.根據權利要求1所述的重組蛋白，其特征在于，還包括免疫刺激分子。

3.根據權利要求2所述的重組蛋白，其特征在于，所述免疫刺激分子為fms樣酪氨酸激酶3配體、TNF-ɑ、IL-2、趨化因子巨噬細胞炎癥蛋白-1ɑ和CD40配體、鈣網蛋白N端、熱休克蛋白、泛素中的至少一種。

4.根據權利要求2所述的重組蛋白，其特征在于，所述免疫刺激分子為鈣網蛋白N端或fms樣酪氨酸激酶3配體。

5.根據權利要求3所述的重組蛋白，其特征在于，

所述鈣網蛋白N端氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示；

所述fms樣酪氨酸激酶3配體氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。

6.根據權利要求2-5任意一項所述的重組蛋白，其特征在于，所述免疫刺激分子與所述16型人乳頭瘤病毒E6和E7變形體的融合多肽以連接肽連接。

7.根據權利要求5所述的重組蛋白，其特征在于，所述連接肽如SEQ ID No.9所示氨基酸序列。

8.編碼權利要求1-7任意一項所述重組蛋白的核酸。

9.根據權利要求8所述的核酸，其特征在于，所述SEQ ID NO.1所示重組蛋白核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。

10.根據權利要求8所述的核酸，其特征在于，

所述SEQ ID NO.3所示鈣網蛋白N端核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示；

所述SEQ ID NO.4所示fms樣酪氨酸激酶3配體核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示。

11.一種重組表達載體，其特征在于，含有權利要求8所述核酸。

12.一種工程菌，其特征在于，含有權利要求11所述的重組表達載體。

13.一種藥物組合物，其特征在于，其包括權利要求1至7任意一項所述的重組蛋白和佐劑。

14.根據權利要求13所述的藥物組合物，其特征在于，所述佐劑為油/水乳化劑ISA51、TLR3激動劑poly I:C、表面活性劑類免疫刺激復合物ISCOMATRIX、CpG-ODN中的至少一種。

15.根據權利要求13所述的藥物組合物，其特征在于，還包括可藥用載體，所述可藥用載體包括乳糖、蔗糖、葡萄糖、山梨糖醇、淀粉、阿拉伯膠、藻酸鹽、明膠、磷酸鈣、纖維素、水、羥基苯甲酸甲酯、滑石粉、硬脂酸鎂、礦物油中的至少一種。

16.根據權利要求1至7任意一項所述的重組蛋白或/和權利要求13至15任意一項所述的藥物組合物在制備提高針對人乳頭瘤病毒的體液免疫和細胞免疫免疫應答的藥物中的應用。