[發明專利]一種pH敏感的納米化Bcl-2選擇性抑制劑的制備方法及產物和應用

有效

• 申請號: 201710056413.5
• 申請日: 2017-01-25
• 公開（公告）號: CN106822916B
• 公開（公告）日: 2020-02-28
• 發明（設計）人: 凌代舜;李方園;李銳清;沈華浩;應頌敏
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: A61K47/69
• 分類號: A61K47/69;A61K47/54;A61K45/00;A61K31/787;A61P11/06
• 代理公司: 杭州天勤知識產權代理有限公司 33224
• 代理人: 陳華

本發明涉及一種pH敏感的納米化Bcl?2選擇性抑制劑的制備方法，包括如下步驟：1)將兩親性高分子溶于良溶劑中，加入具有pH響應性基團的修飾劑，攪拌反應，透析后，得到pH敏感的兩親性聚合物；2)將步驟1)中的pH敏感的兩親性聚合物和Bcl?2選擇性抑制劑溶于良溶劑中攪拌反應，得到混合溶液；3)將步驟2)中的混合溶液經過旋蒸，透析，離心后，得到pH敏感的納米化Bcl?2選擇性抑制劑。本發明還涉及制備得到的pH敏感的納米化Bcl?2選擇性抑制劑及其應用。該制備反應體系溫和，條件可控，所制備的材料均具有良好的生物相容性，具有良好的臨床轉化可能性。

技術領域

本發明涉及Bcl-2選擇性抑制劑的制備領域，具體涉及一種pH敏感的納米化Bcl-2選擇性抑制劑的制備方法及產物和應用。

背景技術

哮喘是一種很嚴重的呼吸道疾病，它影響了世界范圍內數百萬人的健康，并且患者的數目呈現出上升的趨勢。哮喘是具有多種亞型的呼吸道炎癥疾病，先天性和適應性的免疫系統相互作用會引起炎癥細胞的募集，氣道高反應性，粘液分泌過多和氣道重塑。

目前，糖皮質激素或結合長期短效β-激動劑支氣管擴張劑(LABA或SABA)和白三烯拮抗劑(LTRAs)作為治療哮喘的一線藥物，對大多數的哮喘患者都能起到良好的治療效果。然而，仍有一部分的哮喘患者病情不能被有效控制。吸入糖皮質、單克隆抗體和針對特定的細胞因子/趨化因子拮抗劑已經被用于中度到重度的難治性哮喘，然而這樣的治療方案只針對過度表達的特定位點，如IL-4和IL-5等。基于抗體的治療方案并不是對所有類型的哮喘都能起效。目前的治療方案，針對“非嗜酸性粒細胞型”哮喘無法進行有效控制。

有研究表明，在嗜酸性粒細胞性和中性粒細胞性的哮喘類型中，抗凋亡蛋白Bcl-2都被顯著表達。目前，Bcl-2蛋白在線粒體上過度表達已經被報道。本發明發現Bcl-2的選擇性抑制劑，能引起炎癥細胞的凋亡并且能有效緩解哮喘癥狀。然而，Bcl-2選擇性抑制劑水溶性極差，并且缺少細胞內靶向性。因此，使得Bcl-2選擇性抑制劑的臨床治療受到了很大的限制，并不能很大程度地發揮其藥效。

發明內容

本發明的目的在于針對現有技術的不足，提供一種pH敏感的納米化Bcl-2選擇性抑制劑的制備方法及產物和應用，該pH敏感的納米化Bcl-2選擇性抑制劑具有良好的哮喘抑制效果，并能克服現有技術的缺陷。

本發明所提供的技術方案如下：

一種pH敏感的納米化Bcl-2選擇性抑制劑的制備方法，包括如下步驟：

1)將兩親性高分子溶于良溶劑中，加入具有pH響應性基團的修飾劑，攪拌反應，透析后，得到pH敏感的兩親性聚合物；

2)將步驟1)中的pH敏感的兩親性聚合物和Bcl-2選擇性抑制劑溶于良溶劑中攪拌反應，得到混合溶液；

3)將步驟2)中的混合溶液經過旋蒸，透析，離心后，得到pH敏感的納米化Bcl-2選擇性抑制劑。

上述制備方法得到的pH敏感的納米化Bcl-2選擇性抑制劑，包含了具備哮喘治療作用的Bcl-2選擇性抑制劑，同時通過pH敏感的兩親性聚合物自組裝形成膠束，以此提高Bcl-2選擇性抑制劑的細胞內微環境靶向，提高抑制哮喘的效果。

pH敏感的納米化Bcl-2選擇性抑制劑(以下簡稱抑制劑)借助其獨特的納米級尺寸，提高納米藥物在肺部的擴散效率，利用pH響應性實現入胞后電位的增強導致線粒體靶向，發揮Bcl-2選擇性抑制劑的效果，實現對炎癥細胞的殺傷。首先，通過氣道內滴注納米級別的藥物能更加良好地在肺部彌散；其次，該抑制劑表面帶正電荷能更有效地被細胞攝取，隨著溶酶體的pH下降，抑制劑表面正電位上升，由于和線粒體的靜電作用使得運載的Bcl-2選擇性抑制劑能更多地與線粒體上的過表達Bcl-2蛋白進行結合，從而提高了藥效。

所述具有pH響應性基團的修飾劑為帶有咪唑、哌啶等基團的小分子化合物。