[發明專利]一種葵花籽粕復合多肽的制備方法

在審

• 申請號: 201710056312.8
• 申請日: 2017-01-25
• 公開（公告）號: CN106834402A
• 公開（公告）日: 2017-06-13
• 發明（設計）人: 黃鳳洪;萬楚筠;郭婷婷;曾濤;李文林;鄧乾春;鄭明明;湯虎;周琦;劉昌盛;時杰;鄭暢
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院油料作物研究所
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/14
• 代理公司: 湖北武漢永嘉專利代理有限公司42102
• 代理人: 張惠玲

技術領域

本發明涉及油料餅粕深加工技術領域，具體涉及一種葵花籽粕復合多肽的制備方法。

背景技術

向日葵是世界四大油料作物(大豆、向日葵、油菜和花生)之一，也是我國的主要油料作物之一。葵花籽榨取油脂后的籽粕中蛋白含量為30％～50％，脂肪含量為1％～8％，灰分為5％～10％。其中葵花籽粕(餅粕)蛋白因其氨基酸含量豐富且平衡良好、生物利用率高和無抗營養因子而被作為植物蛋白的重要來源。

餅粕蛋白經酸堿或酶水解后可得到活性多肽，現代營養學研究發現，蛋白質水解后以短肽(2～7個氨基酸)形式被機體直接消化吸收的比例遠大于以游離氨基酸形式，而且吸收更快。肽的吸收主要是由依賴H⁺濃度或Ca²⁺濃度的主動轉運過程、具有pH依賴性的非耗能性Na⁺/H⁺交換系統以及谷胱甘肽轉運系統完成的，且短肽的直接吸收可避免氨基酸之間的競爭吸收，效率更高，利于機體中不同組織和器官的利用。即短肽的生物效價和營養價值比氨基酸更高。研究發現餅粕多肽在抗氧化、降血壓、抗腫瘤、增強免疫及降血脂等方面有較高的生物活性。

在制備復合多肽工藝過程中，因肽鍵的斷裂，氨基和羧基發生質子交換，產生了大量的H⁺，為了維護水解體系pH穩定，確保酶的較高工作效率，現有技術通過外加堿液(常用NaOH、KOH)或緩沖液(如磷酸緩沖液等)進行調節，大大增加了酶解產物的灰分含量。這些物質的存在不僅降低了產物純度，還可能危害人體健康。科學研究發現高鈉鹽的攝入會使鈉泵抑制因子釋放增加，被大量吸收進入血液，使腎臟對鈉和水的重吸收減少，造成鈉和水滯留，從而使血容量增加及刺激血管壁收縮，嚴重時可引發高血壓。高鉀鹽的攝入可引起血鉀過高，主要表現極度倦怠、肌肉無力、嗜睡、心率減慢或心臟停搏等。故在制備復合多肽時須進行脫鹽精制處理。

目前常用的脫鹽手段包括離子交換樹脂、大孔樹脂脫鹽法，葡聚糖凝膠柱脫鹽法，超濾、納濾膜分離法等。這些方法操作比較繁瑣而且肽的回收率較低，應用不夠方便。因此，有必要研發一種新型高效、環保的多肽制備方法。

發明內容

本發明的目的是提供一種葵花籽粕復合多肽的制備方法，通過控制酶解過程中的加堿量，利用雙酶組合分步水解，工藝簡單，易于操作，生產成本低，可大大減少多肽產物灰分含量，無需脫鹽處理即可制得符合國標的多肽。

為了實現上述目的，本發明采用的技術方案如下：

一種葵花籽粕復合多肽的制備方法，包括如下步驟：

1)原料處理：將原料葵花籽粕粉碎后，按質量比為1:9～11的料液比加入葵花籽粕粉和蒸餾水，調pH值為3.5～4.5，在沸水中加熱攪拌3～8min，離心分離，收集沉淀物，得到濕熱處理物；

2)一次酶解：按質量比為1:9～11的料液比加入濕熱處理物和蒸餾水，調pH值，添加2～4wt％外切蛋白酶，55～65℃下酶解2h，滅酶，冷卻；

3)二次酶解：在一次酶解后的混合液中添加2.5～3.5wt％內切蛋白酶，50～60℃下酶解1.5～2.5h，滅酶，離心分離，取上清液，即酶解液；

4)濃縮：采用減壓真空濃縮方式將酶解液濃縮至原體積的1/3；

5)噴霧干燥：在進樣速率為16～20mL/min、進風口溫度為100～130℃、風速頻率為26～28的條件下干燥，即得成品。

根據以上方案，所述原料處理時的離心分離采用布袋式離心機、干燥采用冷風干燥機。

根據以上方案，所述一次酶解時采用NaOH溶液調節pH值為6.0～8.0，所述NaOH溶液的濃度為1.0～1.5mol/L。

根據以上方案，所述外切蛋白酶為堿性蛋白酶。

根據以上方案，所述內切蛋白酶包括復合蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶或風味蛋白酶中的任意一種或一種以上的混合物。

根據以上方案，所述減壓真空濃縮采用旋轉蒸發器。

本發明的有益效果是：

1)本發明以葵花籽榨油后的副產物即葵花籽粕為原料制備復合多肽，充分發揮其功能性和經濟價值，對促進油料加工副產物的增值利用具有重要意義；

2)本發明采用低pH值與雙酶分步酶解，一方面避免了常用高pH值單酶酶解造成的產物高鹽問題，后期不需分離鹽；另一方面，酶解過程中采用外切酶和內切酶相結合，分別作用于蛋白外部和內部的肽鍵，有利于多肽的產生，確保了產物中多肽的含量和提取率，既縮短了生產周期，又降低了生產成本；

3)本發明的工藝簡單，易于操作，“三廢”排放量少，適合工業化生產。