[發明專利]化學?酶法制備熊去氧膽酸在審
| 申請號： | 201710052978.6 | 申請日： | 2017-01-24 |
| 公開（公告）號： | CN106701882A | 公開（公告）日： | 2017-05-24 |
| 發明（設計）人： | 竺偉;高新星 | 申請（專利權）人： | 尚科生物醫藥（上海）有限公司 |
| 主分類號： | C12P33/06 | 分類號： | C12P33/06;C12P33/02 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 201318 上海市浦*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 化學 法制 備熊去氧 膽酸 | ||
1.一種化學-酶法制備熊去氧膽酸(化合物I)的方法，其特征在于，合成路線如下：
反應步驟包括：
步驟a：去氧膽酸(化合物II)在12α-羥基類固醇脫氫酶(12α-HSDH)、輔酶、第一輔酶再生體系、磷酸鹽緩沖液的作用下發生氧化反應得到12-酮去氧膽酸(化合物III)；
步驟b：化合物III進行脫羰基還原反應得到膽石酸(化合物IV)；
步驟c：化合物IV在7α-羥化酶(7α-LCAH)催化作用下進行羥基化反應得到熊去氧膽酸(化合物I)。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟a中所述輔酶為NAD或NADP。
3.如權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟a中所述第一輔酶再生體系為醇脫氫酶/丙酮體系或乳酸脫氫酶/丙酮酸體系。
4.如權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟a中化合物II的濃度為20～100g/L，12α-羥基類固醇脫氫酶的濃度為5～10g/L，丙酮濃度為5～20％(V/V)，輔酶的濃度為0.01～0.1g/L，醇脫氫酶的濃度為1～5g/L，磷酸鹽緩沖液的濃度為40～80mM。
5.如權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟b中所述脫羰基還原反應在180℃～220℃、水合肼作用下進行，其中所述水合肼與化合物III的摩爾比為1:1～1:3。
6.如權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟c中所述羥基化反應是將化合物IV、
7α-LCAH、輔酶、第二輔酶再生體系、磷酸鹽緩沖液按一定比例混合反應得到。
7.如權利要求6所述的方法，其特征在于：所述第二輔酶再生體系為醇脫氫酶/異丙醇體系。
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