[發(fā)明專利]胸膜肺炎放線桿菌菌影疫苗

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710048310.4
• 申請(qǐng)日: 2017-01-20
• 公開（公告）號(hào): CN106729684A
• 公開（公告）日: 2017-05-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 倪艷秀;何孔旺;王丹丹;祝昊丹;周俊明;呂立新;俞正玉;茅愛(ài)華
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院
• 主分類號(hào): A61K39/02
• 分類號(hào): A61K39/02;A61P31/04;A61P37/04;C12N1/06;C12R1/01
• 代理公司: 南京匯盛專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙)32238
• 代理人: 袁靜

本發(fā)明提供胸膜肺炎放線桿菌菌影疫苗，屬于微生物學(xué)和免疫學(xué)領(lǐng)域。胸膜肺炎放線桿菌菌影疫苗，含有胸膜肺炎放線桿菌血清1型Shope株菌影。本發(fā)明胸膜肺炎放線桿菌菌影疫苗，不僅能夠完全保護(hù)同一血清型胸膜肺炎放線桿菌的攻擊，而且能夠?qū)ζ渌逍吞峁┝己玫慕徊婷庖弑Ｗo(hù)，顯著降低了疫苗防疫成本。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于微生物學(xué)和免疫學(xué)領(lǐng)域，具體涉及胸膜肺炎放線桿菌菌影疫苗。

背景技術(shù)

豬傳染性胸膜肺炎(Porcine contagious pleuropneumonia,PCP)是由豬胸膜肺炎放線桿菌(Actinobacilluspleuropneumoniae,APP)引起的一種高度傳染性、致死性的呼吸道疾病。該病原菌血清型較多，可感染各年齡段豬，且分布范圍廣，給養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)了極大的經(jīng)濟(jì)損失。

現(xiàn)有技術(shù)中，每種血清型的APP滅活疫苗只能保護(hù)同一血清型的APP菌株攻擊，顯著提高了疫苗防疫成本。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種胸膜肺炎放線桿菌菌影疫苗，不僅能夠完全保護(hù)同一血清型胸膜肺炎放線桿菌的攻擊，而且能夠?qū)ζ渌逍吞峁┝己玫慕徊婷庖弑Ｗo(hù)，顯著降低了疫苗防疫成本。

本發(fā)明的目的采用如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：

胸膜肺炎放線桿菌菌影疫苗，含有胸膜肺炎放線桿菌血清1型Shope株菌影。

在本發(fā)明中，所述疫苗中的菌數(shù)至少為1×10⁹CFU/mL。

在本發(fā)明中，所述疫苗是將菌影懸浮液與礦物油按照體積比為1:2.5-3.5混合、乳化后獲得的。

在本發(fā)明中，所述菌影是將胸膜肺炎放線桿菌血清1型Shope株采用NaOH處理后得到。

優(yōu)選的技術(shù)方案中，NaOH處理時(shí)的溫度為30-40℃。

優(yōu)選的技術(shù)方案中，所述菌影采用如下方法制備：將培養(yǎng)12-24h的胸膜肺炎放線桿菌血清1型Shope株采用緩沖液懸浮，得到濃度為1×10⁸CFU/mL～1×10⁹CFU/mL的活菌懸浮液；在所述活菌懸浮液中加入2-4mg/ml的NaOH溶液處理40-80min，離心取沉淀，得到菌影；所述活菌懸浮液與NaOH溶液的體積比為1:1。

優(yōu)選的技術(shù)方案中，所述菌影采用如下方法制備：將培養(yǎng)24-72h的胸膜肺炎放線桿菌血清1型Shope株采用緩沖液懸浮，得到濃度為1×10⁸CFU/mL～1×10⁹CFU/mL的活菌懸浮液；在所述活菌懸浮液中加入3.5-6.5mg/ml的NaOH溶液處理55-80min，離心取沉淀，得到菌影；所述活菌懸浮液與NaOH溶液的體積比為1:1。

優(yōu)選的技術(shù)方案中，培養(yǎng)48-72h的胸膜肺炎放線桿菌血清1型Shope株采用4.5-6.5mg/ml的NaOH溶液處理；培養(yǎng)24-48h的胸膜肺炎放線桿菌血清1型Shope株采用3.5-5.5mg/ml的NaOH溶液處理。

有益效果：本發(fā)明胸膜肺炎放線桿菌菌影疫苗具有良好的免疫保護(hù)效力，可以刺激機(jī)體產(chǎn)生高滴度的抗體，不僅能完全保護(hù)同一血清型菌株的攻擊，而且能夠?qū)ζ渌逍吞峁┝己玫慕徊婷庖弑Ｗo(hù)，顯著降低了防疫成本。本發(fā)明利用單一的化學(xué)試劑替代傳統(tǒng)方法來(lái)制備胸膜肺炎放線桿菌菌影，提供了一種新的胸膜肺炎放線桿菌菌影制備方法，取得了良好的效果，并且操作簡(jiǎn)單、快速而高效，顯著降低了生產(chǎn)成本。

附圖說(shuō)明

圖1最小抑菌濃度的NaOH溶液不同處理時(shí)間對(duì)培養(yǎng)12h菌液裂解率的影響。

圖2最小抑菌濃度的NaOH溶液不同處理時(shí)間對(duì)培養(yǎng)24h菌液裂解率的影響。