[發明專利]檢測甲氰菊酯的試紙及其應用

有效

• 申請號: 201710047688.2
• 申請日: 2017-01-22
• 公開（公告）號: CN106918705B
• 公開（公告）日: 2023-06-13
• 發明（設計）人: 馮才偉;汪善良;扶勝;崔海峰;馮靜;徐念琴;楊梅;袁學偉;王江政;袁光宇;羅維超;徐明慧;楊昌松;冉茂乾;王吉平
• 申請（專利權）人: 貴州勤邦食品安全科學技術有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/558;G01N33/531
• 代理公司: 江蘇海越律師事務所 32402
• 代理人: 唐小紅

本發明公開了一種檢測甲氰菊酯的試紙及其應用。試紙包括樣品吸收墊(1)、結合物釋放墊(2)、反應膜(3)、吸水墊(4)和底板(7)，所述樣品吸收墊(1)、結合物釋放墊(2)、反應膜(3)、吸水墊(4)依次粘貼在底板(7)上，所述反應膜(3)上具有包被有甲氰菊酯半抗原?載體蛋白偶聯物的檢測線(5)和包被有羊抗鼠抗抗體的質控線(6)，所述結合物釋放墊(2)包被有甲氰菊酯單克隆抗體?膠體金標記物。本發明提供的試紙可用于茶葉中甲氰菊酯的殘留檢測，操作簡單、靈敏度高、檢測所需時間短、成本低，適合大量樣品的篩查和現場監控。

技術領域

本發明屬于快速檢測技術領域，具體涉及一種檢測甲氰菊酯的試紙，其特別適用于茶葉樣品中甲氰菊酯的檢測。

背景技術

甲氰菊酯(Fenpropathrin)，α-氰基-苯氧基芐基-2,2,3,3-四甲基環丙烷羧基酸酯，又名滅掃利，是一種擬除菊酯類殺蟲殺螨劑。甲氰菊酯屬于神經毒劑，能作用于昆蟲的神經系統，使昆蟲過度興奮、麻痹而死。近年來，擬除蟲菊酯類農藥因具有除蟲高效優點而得到普遍使用，其中的甲氰菊酯在食品中時有檢出，甲氰菊酯對高等動物具有中等毒性。

目前甲氰菊酯殘留的檢測主要為液相色譜、氣相色譜和氣相色譜-質譜法等，儀器方法具有檢測靈敏度高、特異性強等優勢，但是檢測樣本前處理繁瑣、耗時長，并且儀器檢測需要昂貴的大型儀器和設備，配備專業的檢測技術人員，其推廣應用受到一定限制。膠體金免疫層析法具有特異性好、靈敏度高、操作簡便、檢測成本低、適合于批量樣品檢測等優點，是理想的快速篩選手段。

發明內容

本發明的目的在于提供一種檢測靈敏度高、操作簡便、成本低、檢測時間短的檢測甲氰菊酯的試紙及其應用。

本發明所提供的檢測甲氰菊酯的試紙，包括樣品吸收墊1、結合物釋放墊2、反應膜3、吸水墊4和底板7，所述樣品吸收墊1、結合物釋放墊2、反應膜3、吸水墊4依次粘貼在底板7上，所述反應膜3上具有包被有甲氰菊酯半抗原－載體蛋白偶聯物的檢測線5和包被有羊抗鼠抗抗體的質控線6，所述結合物釋放墊2包被有甲氰菊酯單克隆抗體－膠體金標記物。

所述結合物釋放墊2疊放于樣品吸收墊1下，并且結合物釋放墊2的1/3被覆蓋于樣品吸收墊1下。

所述甲氰菊酯半抗原-載體蛋白偶聯物由甲氰菊酯半抗原與載體蛋白偶聯得到，所述載體蛋白為牛血清白蛋白、卵清蛋白、血藍蛋白或甲狀腺蛋白。

所述甲氰菊酯半抗原是由甲氰菊酯與間羥基苯甲醛、氰化鉀、甲氰菊酰氯、對羥基苯丙酸反應合成得到，所示甲氰菊酯半抗原結構式如式(Ⅰ)所示，

所述甲氰菊酯單克隆抗體是以甲氰菊酯半抗原－載體蛋白偶聯物作為免疫原制備獲得；所述羊抗鼠抗抗體是由鼠源抗體免疫羊得到的。

本發明的另一個目的是提供一種上述試紙的制備方法，其主要包括以下步驟：

a)制備包被有甲氰菊酯單克隆抗體－膠體金標記物的結合物釋放墊2；

b)制備具有包被有甲氰菊酯半抗原－載體蛋白偶聯物的檢測線5和包被有羊抗鼠抗抗體的質控線6的反應膜3；

c)將a)和b)制備好的結合物釋放墊2、反應膜3與樣品吸收墊1、吸水墊4和底板7組裝成試紙。

本發明檢測甲氰菊酯的試紙采用高度特異性的抗體抗原反應及免疫層析分析技術，將甲氰菊酯單克隆抗體－膠體金標記物固定于結合物釋放墊上，樣品中的甲氰菊酯在流動過程中，先與結合物釋放墊上的甲氰菊酯單克隆抗體－膠體金標記物，形成藥物－抗體－膠體金標記物。樣品中的藥物與反應膜檢測線上的甲氰菊酯半抗原－載體蛋白偶聯物競爭結合甲氰菊酯單克隆抗體-膠體金標記物，根據檢測線紅色條帶有無或顏色深淺來判斷待測樣品液中甲氰菊酯殘留量，對茶青樣品檢測限為1mg/kg，對干茶樣品檢測限為2mg/kg。