[發明專利]一種L?茶氨酸硒螯合物及制備方法和含該螯合物的含片及制備方法

在審

• 申請號: 201710047521.6
• 申請日: 2017-01-22
• 公開（公告）號: CN106866451A
• 公開（公告）日: 2017-06-20
• 發明（設計）人: 陳立;李建科
• 申請（專利權）人: 陜西師范大學
• 主分類號: C07C231/12
• 分類號: C07C231/12;C07C237/06;C12P13/04;A61K31/198;A61K9/20;A61P37/04;A23L33/165;A23L5/00
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責任公司61200
• 代理人: 李宏德

1.一種L-茶氨酸硒螯合物的制備方法，其特征在于，以L-茶氨酸和硒鹽為原料，以pH值為7-10的緩沖液為反應介質構成反應體系，在70-90℃下混合，反應完全后將反應液分離純化，獲得L-茶氨酸硒螯合物；

所述L-茶氨酸與硒鹽溶液質量比為(3-1)：1；所述的L-茶氨酸由枯草芽孢桿菌發酵所產的γ-谷氨酰轉肽酶，以L-谷氨酰胺和乙胺鹽酸鹽為底物發酵制備得到。

2.根據權利要求1所述的一種L-茶氨酸硒螯合物的制備方法，其特征在于，所述L-茶氨酸硒螯合物具體制備步驟如下：

步驟1，合成L-茶氨酸原料液；

步驟2，將L-茶氨酸原料液脫色過濾后，濾液備用；

步驟3，在濾液中加入濾液質量濃度為35％的硒鹽水溶液；用氫氧化鈉調節至pH值為7-10，氮氣吹掃，于70-90℃下進行2h螯合反應；

步驟4，螯合反應結束后，自然冷卻至室溫，進行純化；將所得螯合液濃縮至原體積1/3-1/6，加入5-8倍體積濃度95％乙醇水溶液，沉淀靜置8-15h，除去上清液，將沉淀用95％的乙醇洗滌抽濾多次，取濾餅干燥后得到L-茶氨酸硒螯合物。

3.根據權利要求2所述的一種L-茶氨酸硒螯合物的制備方法，其特征在于，所述的步驟1的具體步驟如下，

1.1將枯草芽孢桿菌接種在平板培養基上，在37℃下靜置培養16h進行一次活化后，再轉接到液體培養基上進行二次活化；將經兩次活化好的枯草芽孢桿菌二級種子液按體積分數3％接種量轉接于30mL發酵培養液中，置于恒溫培養箱中37℃振蕩培養12-16h；

1.2收集振蕩培養的發酵液離心后得γ-谷氨酰轉肽酶粗酶液；采用分光光度計測定酶活，選取酶活0.01U/mL-0.2U/mL的粗酶液備用，進行催化反應；

1.3分別加入粗酶液質量10％的L-谷氨酰胺和粗酶液質量10％的乙胺鹽酸鹽溶液進行催化反應，L-谷氨酰胺的濃度為15-50mmol/L，乙胺鹽酸鹽的濃度為20-80mmol/L；用乙胺水調節催化反應體系至pH值為10，37℃靜置培養5-8h，合成L-茶氨酸，得到L-茶氨酸原料液。

4.根據權利要求3所述的一種L-茶氨酸硒螯合物的制備方法，其特征在于，步驟2中，加入L-茶氨酸原料液重量2％的活性炭進行吸附脫色，反應過程溫度為60-80℃，反應時間為3-8min。

5.根據權利要求1所述的一種L-茶氨酸硒螯合物的制備方法，其特征在于，所述硒鹽為亞硒酸鈉。

6.一種由權利要求1-5任意一項所述的方法制備得到的L-茶氨酸硒螯合物。

7.一種含L-茶氨酸硒螯合物的含片制備方法，其特征在于，按質量份數計，取粉末狀的L-茶氨酸硒螯合物20-35％，β-環糊精5-20％，葡萄糖5-20％，蔗糖2-10％，檸檬酸1-3％，麥芽糊精5-20％，混合后按質量比例加入1％的硬脂酸鎂，壓片裝袋，即得含L-茶氨酸硒螯合物的含片。

8.一種由權利要求7所述的方法制備得到含L-茶氨酸硒螯合物的含片。