[發明專利]從海藻中提取活性多糖的方法

在審

• 申請號: 201710046367.0
• 申請日: 2017-01-22
• 公開（公告）號: CN106832030A
• 公開（公告）日: 2017-06-13
• 發明（設計）人: 施春華;張美芬
• 申請（專利權）人: 嵊州市派特普科技開發有限公司
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 北京華仲龍騰專利代理事務所(普通合伙)11548
• 代理人: 李靜

1.從海藻中提取活性多糖的方法，其特征在于以下步驟：

1）脫脂、脫苷：將海藻洗凈，粉碎，過篩得到海藻粉末，加入丙酮-石油醚混合液回流脫脂，抽濾，濾渣中加入乙醇回流，抽濾，濾渣烘干；

2）酶解：在步驟1最后得到的濾渣中加入蒸餾水和復合酶制劑酶解，超聲波助溶，酶解結束后滅酶，過濾，取濾液；

3）去蛋白：在濾液中加入Sevage 試劑，攪拌，去除下層液體及絮狀沉淀物，在上層液體中加入乙醇，攪拌，抽濾取濾渣，用無水乙醇和無水丙酮洗滌，旋蒸干燥得到粗制海藻活性多糖粉末；

4）超濾：粗制海藻活性多糖粉末中加入蒸餾水，超濾，取未濾過液，干燥得到粉末；

5）凝膠層析：粉末中加入蒸餾水，凝膠層析，苯酚 - 硫酸法檢測，收集有顯色反應的洗脫液；

6）去鹽、干燥：將洗脫液置于透析袋中透析，取未濾過液，減壓濃縮，冷凍干燥得到活性多糖粉末。

2.根據權利要求1所述的從海藻中提取活性多糖的方法，其特征在于：所述的步驟1中海藻粉末：丙酮-石油醚混合液體積比為1:10~15，丙酮：石油醚體積比為1：1.2~1:1.6，乙醇濃度為85~90%，濾渣：乙醇體積比為1:12~16。

3.根據權利要求1所述的從海藻中提取活性多糖的方法，其特征在于：所述的步驟2中濾渣：蒸餾水體積比:1：25~28，復合酶加入量為3~5%，酶解溫度為52~56℃，pH為2.7~3.4，酶解時間為2.2~2.7h。

4.根據權利要求1所述的從海藻中提取活性多糖的方法，其特征在于：所述的步驟2中復合酶制劑成份及其重量份為：10~20份纖維素酶、10~15份果膠酶、1~3份NaCl、0.001~0.002份焦磷酸鉀、0.5~1份硫酸鎂、0.004~0.006份聚磷酸銨和0.2~0.8份磷酸二氫鈣。

5.根據權利要求1所述的從海藻中提取活性多糖的方法，其特征在于：所述的步驟3中Sevage 試劑：濾液體積比為1:3~5，乙醇濃度為90~98%，上層液體：乙醇體積比為1:3.7~4.5。

6.根據權利要求1所述的從海藻中提取活性多糖的方法，其特征在于：所述的步驟3中先用濾渣體積35~40倍的無水乙醇洗滌，再用30~32倍的無水丙酮洗滌。

7.根據權利要求1所述的從海藻中提取活性多糖的方法，其特征在于：所述的步驟4與步驟6中濾膜規格均為3500~4000Da。

8.根據權利要求1所述的從海藻中提取活性多糖的方法，其特征在于：所述的步驟5中粉末：蒸餾水體積比為1:0.02~0.05，注入 DEAE- 瓊脂糖凝膠柱中色譜分離，先用蒸餾水1.2~1.4mL/min沖洗4.2~4.6h，再用0.5MNaCl 以同樣流速繼續沖洗2.2~2.5h。

9.根據權利要求1所述的從海藻中提取活性多糖的方法，其特征在于：所述的步驟6中減壓濃縮至未濾過液體積的1/100~1/200。