[發(fā)明專(zhuān)利]同時(shí)檢測(cè)葡萄潰瘍病菌和葡萄蔓枯病菌的引物及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710045658.8
• 申請(qǐng)日: 2017-01-22
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN106701968B
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-07-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張瑋;李興紅;燕繼曄;劉梅;周瑩;邢啟凱;盧蝶
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 北京市農(nóng)林科學(xué)院
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/6895
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/6895;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/645
• 代理公司: 北京惟誠(chéng)致遠(yuǎn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11536
• 代理人: 王慧鳳;趙靜

本發(fā)明公開(kāi)了一組同時(shí)檢測(cè)葡萄潰瘍病菌和葡萄蔓枯病菌的雙重PCR引物及其應(yīng)用。該組引物，由序列表中序列1所示的核苷酸、序列表中序列2所示的核苷酸、序列表中序列3所示的核苷酸和序列表中序列4所示的核苷酸組成。這組引物可以在一個(gè)雙重PCR反應(yīng)中分別檢測(cè)到我國(guó)3個(gè)葡萄潰瘍病菌優(yōu)勢(shì)種——小新殼梭孢、可可毛色二孢和葡萄座腔菌與4種葡萄蔓枯病菌的存在，這表明該組引物可以快速、準(zhǔn)確、靈敏的確定葡萄苗木以及田間葡萄病樣中的葡萄潰瘍病菌和葡萄蔓枯病菌，為苗木帶菌檢測(cè)和針對(duì)性防治這2類(lèi)病原菌引起的葡萄枝干病害提供依據(jù)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于植物真菌病原物分子檢測(cè)新技術(shù)，具體涉及采用雙重PCR技術(shù)檢測(cè)葡萄潰瘍病菌和葡萄蔓枯病菌的方法的建立及雙重PCR引物組合物及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

近年來(lái)，葡萄枝干病害在我國(guó)發(fā)生日趨普遍，調(diào)查結(jié)果顯示，到目前為止葡萄枝干病害在我國(guó)遼寧、山東、浙江、廣西等18個(gè)省市均有發(fā)生，并在部分省份的果園中造成了極為嚴(yán)重的損失。我國(guó)的葡萄枝干病害主要有葡萄潰瘍病菌和葡萄蔓枯病，目前已知引起我國(guó)葡萄潰瘍病有6種(Li X H,Yan J Y,Kong F F,et al.Botryosphaeriadothideacausing canker of grapevine newly reported in China.Plant Pathology.2010,59(6):1170.Yan J Y,Peng Y L,Xie Y,et al.First Report of Grapevine Trunk DiseaseCaused by Botryosphaeriaobtusa in China.Plant Disease.2011,95(5):616.Yan J Y,Li X H,Kong F F,et al.Occurrence of Grapevine Trunk Disease Caused byBotryosphaeriarhodina in China.Plant Disease.2011,95(2):219.Yan J Y,Xie Y,Zhang W,et al.Species of Botryosphaeriaceae involved in grapevine dieback inChina.Fungal Diverisity.2013,61:221-236.Dissanayake A J,Zhang W,Liu M,et al.Lasiodiplodiapseudotheobromae causes pedicel and pedunclediscolouration ofgrapes in China.Australasian Plant Disease Notes.2015,10(1):1-5.Dissanayake AJ,Zhang W,Li Xinghong,et al.First report of Neofusicoccummangiferaeassociated with grapevinedieback in China.PhytopathologiaMediterranea.2015,54(2):414-419.)，其中小新殼梭孢(Neofusicoccum parvum)、可可毛色二孢(Lasiodiplodiatheobromae)和葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)是我國(guó)的優(yōu)勢(shì)種群。我國(guó)葡萄蔓枯病的病原菌種類(lèi)有4種，分別是Diaportheeres,Diaporthehongkongensis,Diaporthephaseolorum和Diaporthesojae(Dissanayake A J,Liu M,Zhang W,etal.Morphological and molecular characterizationof Diaporthe speciesassociated with grapevinetrunk disease in China.Fungal Biology.2015,119:283-294.)。在實(shí)際生產(chǎn)中，葡萄潰瘍病菌和葡萄蔓枯病菌在田間常發(fā)生復(fù)合侵染，因此為了能夠有針對(duì)性的防控葡萄潰瘍病和葡萄蔓枯病，開(kāi)發(fā)準(zhǔn)確的早期診斷技術(shù)十分必要。

發(fā)明內(nèi)容