[發明專利]可長期保存的水產養殖用復合乳酸桿菌粉末及其制備方法

在審

• 申請號: 201710044939.1
• 申請日: 2017-01-20
• 公開（公告）號: CN106754549A
• 公開（公告）日: 2017-05-31
• 發明（設計）人: 邵宗澤;單大鵬;李旭;林劍輝;王麗萍
• 申請（專利權）人: 國家海洋局第三海洋研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23K50/80;A23K10/18;A23K20/163;A23K20/147;A61K35/747;A61P31/04;C12R1/25;C12R1/23
• 代理公司: 廈門南強之路專利事務所(普通合伙)35200
• 代理人: 馬應森

技術領域

本發明涉及水產養殖，尤其是涉及一種可長期保存的水產養殖用復合乳酸桿菌粉末及其制備方法。

背景技術

抗生素應用在畜牧業產生了巨大的經濟效益。但抗生素的大量使用所伴隨的負面效應也日益突出，主要表現為病原微生物的耐藥性的產生以及藥物在動物體內的殘留，從而對人類的健康產生直接或者潛在的危害。抗生素在飼料中的應用遇到嚴峻的挑戰。以及目前我國飼料改善肉蛋白品質通過化學藥品的方法逐步引起人們的憂慮，如蘇丹紅，瘦肉精等違禁藥物的添加及抗生素的過量添加來改善肉蛋品質等層出不窮，對食品安全造成威脅。開發安全無毒綠色的生物飼料添加劑來改善肉品質是目前畜牧業發展的趨勢。因此抗生素替代品(微生態制劑等)的研究開發成為近年來綠色飼料添加劑的熱點，其中植物乳桿菌的應用備受關注。植物乳桿菌是農業部批準認可用于飼料添加劑的菌種，其特征是產酸、產酶的抑制腸道病原菌的作用。植物乳桿菌通過改善動物腸道的微生態環境和提高動物的免疫力而提高動物的生產性能，而且在動物產品中無殘留。但是采用傳統的碳氮源優化的方法能使乳桿菌達到10⁹CFU/ml后，再提高碳氮源含量后很難進一步提高菌體含量。市售乳酸球菌保持活力較長，而乳酸桿菌產品保質期較短，但桿菌有不同于球菌的特殊的生理活性。

本申請人在中國專利CN103497906A中公開一種微生態制劑及其制備方法與應用，涉及水產養殖。微生態制劑含有枯草芽孢桿菌、短小芽孢桿菌中的至少一種和植物乳桿菌、嗜酸乳桿菌中的至少一種；

植物乳桿菌包括：植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)1A07806，保藏編號CCTCC NO:M 2013293；

嗜酸乳桿菌包括：嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)PL7，保藏編號CCTCC NO:M 2013294。

在制備促進對蝦或石斑魚生長，提高對蝦或石斑魚免疫力和抗病力，防治病害，提高存活率，凈化養殖水質制劑中應用。

發明內容

本發明目的在于針對當前抗生素濫用的情況，提供可長期保存的水產養殖用復合乳酸桿菌粉末及其制備方法。

本發明的另一目的在于提供所述可長期保存的水產養殖用復合乳酸桿菌粉末的應用。

所述可長期保存的水產養殖用復合乳酸桿菌粉末含有：植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)1A07806和嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)PL7及其微囊外壁。

所述微囊外壁可采用水溶性食用膠、環狀糊精、纖維素衍生物、明膠、酪蛋白等中的至少兩種作為微囊外壁，所述微囊外壁可通過微囊制粒機對樣品進行乳化、混合、造粒、干燥，制備成包埋著乳酸菌體的微囊外壁，制成可長期保存的水產養殖用復合乳酸桿菌粉末。

所述植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)1A07806的保藏編號為CCTCC NO：M2013293；

所述嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)PL7的保藏編號為CCTCC NO：M2013294。

所述可長期保存的水產養殖用復合乳酸桿菌粉末的制備方法包括以下步驟：

1)配制種子培養基500ml，滅菌；

2)將凍存的菌種活化劃線于相應的平板，再將活化后的單克隆接種于種子培養基培養；

3)配制發酵培養基，將50L發酵培養基作為一級種子培養基，加入低聚果糖或海藻糖中的一種作為促進乳酸菌生長劑，滅菌；

4)將步驟2)培養獲得的初級活化種子接種于50L一級種子培養基中培養，再通過移種管接種于1000L發酵培養基中培養，活菌數≥8×10⁹CFU/mL；

5)發酵結束后，管式離心機離心收集菌體，得菌泥；

6)將步驟5)獲得的菌泥添加維生素C、海藻糖、淀粉糊精、低聚果糖等中的至少兩種作為保護劑，混合均勻后，再平鋪于樣品凍干機的樣品板，并將菌泥分成小塊；

7)將步驟6)獲得的植物乳桿菌粉末與維生素C、葡萄糖、淀粉混合，采用水溶性食用膠、環狀糊精、纖維素衍生物、明膠、酪蛋白等中的至少兩種作為微囊外壁，通過微囊制粒機對樣品進行乳化、混合、造粒、干燥，制備成包埋著乳酸菌體的可長期保存的水產養殖用復合乳酸桿菌粉末。

在步驟1)中，所述滅菌的溫度可為115℃，滅菌的時間可為30min。

在步驟2)中，所述培養可靜置培養18h。